为什么干细胞自己凋亡了？

121qwq

感觉养的其中一个间充质干细胞自己凋亡了，不像污染，因为没有浑浊，但是有部分细胞自己好像在慢慢卷缩死亡，有有经验的朋友知道吗？1 L$ d" u1 x! Y0 ]0 a# b

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这个是另外一株养得挺好的
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鸵鸵

细菌污染的话细胞培养液会比较浑浊，真菌污染反应出来的特征比较缓慢，建议你先排除下真菌污染，另外，也碰到消化过度出现这种情况

121qwq

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4 i6 g3 W" F4 [4 g% H, a* q0.25的胰酶消化2min怎么样？ 一般都用什么浓度的胰酶消化多久

鸵鸵

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+ l" t* M( t2 Z; R. m0 |7 o/ [2 e$ P- k/ j5 F( W
我们用0.05的胰酶，放在培养箱中进行消化，但要注意观察，细胞生长状态良好时，消化的会非常快，之前用0.25的，但总是会消化过度，所以就稀释了，不知道你们消化前用PBS清洗几遍？

luoziwei

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, B- c" n7 u& L- n* |3 a- W楼主，你这是刚接种的细胞密度太少了，等细胞长满自然就变成扁平状了，哪里还是MSC呀。一般一个T75瓶子长到90%的时候就要传代分为两个瓶子合适，MSC的生长密度也很重要

baby00000003

先把培养条件查一遍，比如血清批号、培养箱校准之类的- K2 r8 B- X( v# d+ e' ]5 p0 K  I
然后是细胞批次，比如冻存、解冻条件什么的
+ p' F5 _' m8 ?( _8 n如果没发现什么异常就换一批细胞重新试试看～

121qwq

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: m- ]! v" T- J8 l  Q- H) Y1 a  G5 I7 T  B# y! C6 E4 S" j. ^7 M
没办法，本来分离的细胞就不多

121qwq

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8 p: W% J& M7 k- f1 }: i) I4 O1 e& Q1 H/ @" F8 Q
PBS洗两遍，你们0.25胰酶稀释是怎么稀释，消化条件是怎样的？

chenguangyu

建议测量一下或重新对培养箱的二氧化碳浓度进去校准。可能是二氧化碳浓度偏低导致的。