为什么干细胞自己凋亡了？

121qwq

感觉养的其中一个间充质干细胞自己凋亡了，不像污染，因为没有浑浊，但是有部分细胞自己好像在慢慢卷缩死亡，有有经验的朋友知道吗？
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: A- c* t7 r% s( \" G* q
( F1 M! J% Z: v# K$ v) G这个是另外一株养得挺好的
( i! Q2 X4 z) O

鸵鸵

细菌污染的话细胞培养液会比较浑浊，真菌污染反应出来的特征比较缓慢，建议你先排除下真菌污染，另外，也碰到消化过度出现这种情况

121qwq

回复 鸵鸵 的帖子8 c$ }6 F( d! L* R5 P3 d4 w$ c! ^

1 H  B5 G( n5 n; h0.25的胰酶消化2min怎么样？ 一般都用什么浓度的胰酶消化多久

鸵鸵

回复 121qwq 的帖子9 Z! d2 d2 ^% R# o& b; Q5 R

' K6 g( F8 I; W8 F: A我们用0.05的胰酶，放在培养箱中进行消化，但要注意观察，细胞生长状态良好时，消化的会非常快，之前用0.25的，但总是会消化过度，所以就稀释了，不知道你们消化前用PBS清洗几遍？

luoziwei

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. D% W7 b8 |  M9 S1 l4 a楼主，你这是刚接种的细胞密度太少了，等细胞长满自然就变成扁平状了，哪里还是MSC呀。一般一个T75瓶子长到90%的时候就要传代分为两个瓶子合适，MSC的生长密度也很重要

baby00000003

先把培养条件查一遍，比如血清批号、培养箱校准之类的
6 s/ t& \8 e+ I+ U2 X; S4 L. r3 y然后是细胞批次，比如冻存、解冻条件什么的
3 H: k9 q7 \7 u% r如果没发现什么异常就换一批细胞重新试试看～

121qwq

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) i0 u1 l. w, e4 W- }0 ?; \; I$ d* w
6 k" b% M6 B+ E6 Q6 {( a* m没办法，本来分离的细胞就不多

121qwq

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8 r6 s( Q7 y- VPBS洗两遍，你们0.25胰酶稀释是怎么稀释，消化条件是怎样的？

chenguangyu

建议测量一下或重新对培养箱的二氧化碳浓度进去校准。可能是二氧化碳浓度偏低导致的。