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为什么干细胞自己凋亡了?   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-9-14 10:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
感觉养的其中一个间充质干细胞自己凋亡了,不像污染,因为没有浑浊,但是有部分细胞自己好像在慢慢卷缩死亡,有有经验的朋友知道吗?
7 t: P# r2 R; l# |6 d! n- K# @
9 d; [1 L" Y4 w7 |3 w% F
$ b! R2 q* l# E1 H0 a+ C0 X  G! a/ m$ ]& ^5 U
这个是另外一株养得挺好的% p- `  E+ R0 H: ~% l
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沙发
发表于 2015-9-14 10:39 |只看该作者
细菌污染的话细胞培养液会比较浑浊,真菌污染反应出来的特征比较缓慢,建议你先排除下真菌污染,另外,也碰到消化过度出现这种情况
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藤椅
发表于 2015-9-14 11:23 |只看该作者
回复 鸵鸵 的帖子# F, _" l# ]9 {/ \, j- y1 i: V: G

8 x9 k! A, H7 u1 ^0.25的胰酶消化2min怎么样? 一般都用什么浓度的胰酶消化多久
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板凳
发表于 2015-9-14 13:24 |只看该作者
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报纸
发表于 2015-9-14 13:28 |只看该作者
回复 121qwq 的帖子1 J7 m( ]+ n3 S; N! Y% z$ A  e

( T. n2 I6 I0 j& f1 z& h9 ]3 f我们用0.05的胰酶,放在培养箱中进行消化,但要注意观察,细胞生长状态良好时,消化的会非常快,之前用0.25的,但总是会消化过度,所以就稀释了,不知道你们消化前用PBS清洗几遍?
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地板
发表于 2015-9-14 14:07 |只看该作者
回复 121qwq 的帖子
7 U% m, V+ Y6 x7 u
9 S# {! K# j3 {5 d: L/ R5 L1 ?楼主,你这是刚接种的细胞密度太少了,等细胞长满自然就变成扁平状了,哪里还是MSC呀。一般一个T75瓶子长到90%的时候就要传代分为两个瓶子合适,MSC的生长密度也很重要
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发表于 2015-9-14 19:02 |只看该作者
先把培养条件查一遍,比如血清批号、培养箱校准之类的3 Y6 A/ g( n4 t) R
然后是细胞批次,比如冻存、解冻条件什么的5 \) D1 \' T/ \# k! |, |& \4 B
如果没发现什么异常就换一批细胞重新试试看~
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发表于 2015-9-14 19:46 |只看该作者
回复 luoziwei 的帖子9 b5 S' Y+ R4 m. g: ]0 U+ A' U

' d3 u$ c& m1 ]5 y% F  p没办法,本来分离的细胞就不多

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发表于 2015-9-14 19:46 |只看该作者
回复 鸵鸵 的帖子
1 {+ R! \  M& K3 R2 t
) A" f6 b9 t% O' _  t3 P7 @+ E& `- ^PBS洗两遍,你们0.25胰酶稀释是怎么稀释,消化条件是怎样的?
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发表于 2015-9-14 20:26 |只看该作者
建议测量一下或重新对培养箱的二氧化碳浓度进去校准。可能是二氧化碳浓度偏低导致的。
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