为什么干细胞自己凋亡了？

121qwq

感觉养的其中一个间充质干细胞自己凋亡了，不像污染，因为没有浑浊，但是有部分细胞自己好像在慢慢卷缩死亡，有有经验的朋友知道吗？
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  Z3 {$ T/ h3 U0 n% i* b这个是另外一株养得挺好的
6 r. }/ B2 M; x5 ^; a

鸵鸵

细菌污染的话细胞培养液会比较浑浊，真菌污染反应出来的特征比较缓慢，建议你先排除下真菌污染，另外，也碰到消化过度出现这种情况

121qwq

回复 鸵鸵 的帖子* n$ [/ d* ^$ f: W1 y, E8 B' o1 I

9 ^! z5 _8 v: R0.25的胰酶消化2min怎么样？ 一般都用什么浓度的胰酶消化多久

鸵鸵

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# M* ^+ G" g% q8 D8 T1 f
" r# ~& x2 N7 Z) m& e) Z2 y9 _我们用0.05的胰酶，放在培养箱中进行消化，但要注意观察，细胞生长状态良好时，消化的会非常快，之前用0.25的，但总是会消化过度，所以就稀释了，不知道你们消化前用PBS清洗几遍？

luoziwei

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; b/ k. Y1 T4 _
7 U- t% Z; ?/ l8 A楼主，你这是刚接种的细胞密度太少了，等细胞长满自然就变成扁平状了，哪里还是MSC呀。一般一个T75瓶子长到90%的时候就要传代分为两个瓶子合适，MSC的生长密度也很重要

baby00000003

先把培养条件查一遍，比如血清批号、培养箱校准之类的
. ~! k. A+ }; [( o然后是细胞批次，比如冻存、解冻条件什么的
  b! j+ j# E" n( e) I8 Q$ Q如果没发现什么异常就换一批细胞重新试试看～

121qwq

回复 luoziwei 的帖子7 @* L' P  G# K
9 X0 c6 v& T  o) r. M) N9 P. M
没办法，本来分离的细胞就不多

121qwq

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" D" O' x. X" `6 e0 J
4 F) A; z, p" X  ZPBS洗两遍，你们0.25胰酶稀释是怎么稀释，消化条件是怎样的？

chenguangyu

建议测量一下或重新对培养箱的二氧化碳浓度进去校准。可能是二氧化碳浓度偏低导致的。