为什么干细胞自己凋亡了？

121qwq

感觉养的其中一个间充质干细胞自己凋亡了，不像污染，因为没有浑浊，但是有部分细胞自己好像在慢慢卷缩死亡，有有经验的朋友知道吗？
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这个是另外一株养得挺好的% p- `  E+ R0 H: ~% l

鸵鸵

细菌污染的话细胞培养液会比较浑浊，真菌污染反应出来的特征比较缓慢，建议你先排除下真菌污染，另外，也碰到消化过度出现这种情况

121qwq

回复 鸵鸵 的帖子# F, _" l# ]9 {/ \, j- y1 i: V: G

8 x9 k! A, H7 u1 ^0.25的胰酶消化2min怎么样？ 一般都用什么浓度的胰酶消化多久

鸵鸵

回复 121qwq 的帖子1 J7 m( ]+ n3 S; N! Y% z$ A  e

( T. n2 I6 I0 j& f1 z& h9 ]3 f我们用0.05的胰酶，放在培养箱中进行消化，但要注意观察，细胞生长状态良好时，消化的会非常快，之前用0.25的，但总是会消化过度，所以就稀释了，不知道你们消化前用PBS清洗几遍？

luoziwei

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9 S# {! K# j3 {5 d: L/ R5 L1 ?楼主，你这是刚接种的细胞密度太少了，等细胞长满自然就变成扁平状了，哪里还是MSC呀。一般一个T75瓶子长到90%的时候就要传代分为两个瓶子合适，MSC的生长密度也很重要

baby00000003

先把培养条件查一遍，比如血清批号、培养箱校准之类的3 Y6 A/ g( n4 t) R
然后是细胞批次，比如冻存、解冻条件什么的5 \) D1 \' T/ \# k! |, |& \4 B
如果没发现什么异常就换一批细胞重新试试看～

121qwq

回复 luoziwei 的帖子9 b5 S' Y+ R4 m. g: ]0 U+ A' U

' d3 u$ c& m1 ]5 y% F  p没办法，本来分离的细胞就不多

121qwq

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) A" f6 b9 t% O' _  t3 P7 @+ E& `- ^PBS洗两遍，你们0.25胰酶稀释是怎么稀释，消化条件是怎样的？

chenguangyu

建议测量一下或重新对培养箱的二氧化碳浓度进去校准。可能是二氧化碳浓度偏低导致的。