关于NK细胞的提取和培养

御剑红尘

最近要做NK方面的试验，求大神赐教方法。

xcf20305

详细参考旧帖：http://www.stemcell8.cn/thread-89874-1-1.html

御剑红尘

回复 xcf20305 的帖子- ]6 J1 v4 B$ k! i( O
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非常感谢

hwlightning

主要是哪方面？？  

御剑红尘

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9 S' W; J9 x6 _' p7 ^9 Y细胞的提取和扩增

hwlightning

目前NK细胞的提取采用单纯细胞因子诱导和添加饲养层细胞。) D9 V; c3 V% \  I

御剑红尘

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8 d2 h; H' q* _
- V$ ?; j. }4 ?2 D国内主要还是单纯采用细胞因子来诱导，如果采用饲养层，技术和伦理还是很难突破的。如果单纯用因子，再用磁分选分离出NK细胞后，以后的培养顺序和添加的因子能方便透漏吗？

hwlightning

我觉得用饲养层无论是细胞数量和细胞纯度都比单纯用细胞因子要高。/ B/ m7 t( ^& n2 D; X
我以前也是用的细胞因子诱导，细胞数量也就二三十亿，纯度50%左右。后面自己用饲养层能达到50亿以上，纯度也是90%以上。
5 b! D# v! D) @  p有些不方便透露，不好意思。

御剑红尘

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# C2 R* j/ n% P. _/ p$ ^
/ i& y& E: O7 x- t6 XNK细胞的饲养层细胞常用的是K562，即人慢性髓原白血病细胞。做做科研还可以，如果在临床上推广还是有点难度的，毕竟涉及到病原细胞，至今NK细胞和K562细胞之间的相互作用原理还没搞清楚吧？就如同TIL在国内很难临床开展一样。虽然说数目和纯度都远远高于纯因子组，但有潜在的危险，临床接受还是有点难度。这是个人观点，欢迎批评。