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楼主: jifengtang
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脐带贴块法间充质干细胞培养原代细胞生长少   [复制链接]

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发表于 2016-1-7 16:43 |只看该作者
回复 jenny114402 的帖子1 Q8 e: D& `+ l, u9 [- @
1 Z2 }3 m& |( Z3 a; l
你好,请问华通氏胶如何分离

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小小研究员

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发表于 2016-1-8 13:34 |只看该作者
回复 jndxdff 的帖子* T2 ~0 Z7 q  V# I4 {
- i/ I" L. X# E0 S# G! \( R6 \3 u
搜索论坛 很多这方面的内容

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发表于 2016-1-8 20:43 |只看该作者
1.剪得可能不够碎; f8 q. Q% h& q$ H
2.每2-3天观察一下细胞形态、数量和培养基的状态,然后补液或换液  % B# [+ d0 q7 G" y
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发表于 2016-1-8 20:46 |只看该作者
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回复 木头1102 的帖子. Z, I; i3 h9 o/ U* Q8 t$ E! w2 I
$ |" m6 S& e8 F6 _; B5 H! E! U
请问华通氏胶怎么从脐带上分离出来呢   肉眼观察颜色都比较浅 怎么辨别呢  

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发表于 2016-1-8 20:49 |只看该作者
回复 张杉杉 的帖子1 q# ]" v; H  w" p! _: Z& ]$ k
6 m# s5 a- c# o( C5 `
期间定期观察细胞状态,看看细胞生长情况,培养基状态  需要换液或加液  
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发表于 2016-1-8 20:52 |只看该作者
回复 jifengtang 的帖子& w0 \& x  P  r, R7 a9 j
4 L/ [5 K  [( K; q
不是   两者独立  悬浮法比较简单  酶解法操作麻烦点
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发表于 2016-1-11 09:02 |只看该作者
回复 jndxdff 的帖子
' m& N4 [3 J5 o: i: M% @- b9 }" [- H1 _; V2 J& O
肉眼还是能看出来的,一般华通胶是发黄透明,羊膜比较白,一条一条撕下来,我有时不分离羊膜和华通胶,细胞一般10天也能爬出来
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发表于 2016-1-12 21:44 |只看该作者
我是把华通胶剥离剪碎做组织块铁贴壁
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发表于 2016-1-19 14:58 |只看该作者
回复 jifengtang 的帖子" ~5 I5 Y& b5 p5 s. B8 R

+ O+ _: J! N) D+ {1 s8 P0 [这个大小可以,可以多贴点,在75t瓶中,67十都可以,你可以第一天换一次半量,3-5再换一次,你可以试试
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发表于 2016-1-20 09:22 |只看该作者
回复 jifengtang 的帖子
# f0 H, g4 p* B  x( ^3 ^
( ^, H6 m5 }# ]' l5 T1 s1、可以多贴一些组织块;
" Q' x  q4 S2 }" z" G& D4 z$ e4 ^2 J: E2、时间:一般一周左右出细胞,如果时间不够再等等,只要不污染基本都会有细胞;1 Y5 [1 T+ S' m$ ^2 ?+ y/ e5 X) e8 m
3、组织要用华通氏胶,好贴而且不容易出现杂细胞。
2 l' @7 ^1 r4 Y# @+ _$ u2 ?$ W我的方案
" r( X& c6 B9 s, A8 l1、脐带剪段,生理盐水洗,不用双抗
7 |$ r$ l# H0 R1 p  S" L- \. x2、除去动脉和静脉血管,撕华通氏胶(如果有血迹,再用生理盐水洗)
) Q7 b- z; z9 \+ p8 w5 l7 C% `1 j3、胶在离心管中剪碎
8 s0 N% X3 f$ \2 l4 r4、用培养液悬起组织块,加入培养瓶(皿); ?/ z% \, {0 |. D
5、补加合适量的培养液,培养
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