关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。- b; M- s* K) J, D  c; t
2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。
# f' Y: l( t1 [3.染色前需加60%异丙醇5min。( N7 W7 o# V$ D- h% ?, Q
4.染色时间15~20min。
5 ]# q6 r' f$ E) {* V4 O( z( _! W( h5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。- M% [, ^" D) j; X: z
6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。
# t" y6 l: j! `步骤# Q* ^! U3 n9 Q1 w
1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上0 D" g- |+ _2 f9 H- v! T. V
2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次2 E) u  U& J/ d. W/ ]5 u5 W( B
3、染色：加油红O染液染色10-60min
* t) n* b4 B" w9 F- e1 m  h: H  M4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着2 T' D6 s( U; s6 I; a- l
5、拍照记录6 m- F% o: ~  I4 d) |2 ~$ G2 E

. R1 B( b- k* N& E! h) v; x* k注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢4 R9 Y0 p5 s+ I; r1 q

6 a' k, w. c2 j( B& F3 W( q$ e+ Y  I# Y$ t3 Q附图：
+ J! s+ D) a: [1 S8 S+ y0 r

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子/ j5 I& E. |) Y* Y7 k5 J

6 ~4 |% O! X5 K5 X好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

回复 glysh 的帖子
7 q. z9 v: E  @9 Y% d4 y# v# Y6 Q, `( B3 `2 q. d
如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子: ~& v5 y* s  r

  J# x2 d* }) [: J; U4 h5 `' d& }2 i一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
8 Y+ V# {) m; _% g. A9 p$ `稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因