关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。7 [* W5 S. d" ~  y: u: V& X9 o
2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。
7 R& l: ^6 D; ?% F3 v5 Y3.染色前需加60%异丙醇5min。# ]8 k5 u4 k9 G
4.染色时间15~20min。, e: X1 D0 c( z- {9 j& X7 r
5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。4 B* N4 w& A7 a. H+ J" w
6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。
9 M9 {$ f" B& r6 D步骤
: E' K9 V  Z* ^) N) \3 o1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上# S- m5 @8 X, B" k
2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次2 r  x* b9 }/ I( W2 m' D5 |. f2 @
3、染色：加油红O染液染色10-60min0 t. o: S9 Z& a1 v
4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着
8 f! A5 Y+ \7 L+ B5、拍照记录" u5 w( g2 i0 S, j% ~
& @6 B6 Z9 y; l
注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢$ c( W* ~- Q7 W; a5 d. G- T
/ d/ ]+ ]: @5 c9 ?& d2 I8 ^
附图：
$ }. X8 Q+ S. G0 c  J0 B9 x

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子& v2 B; Z' Q' `8 f6 e, N7 L& Q0 i

+ v1 Q) ^" e8 p; R9 r好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

回复 glysh 的帖子/ Q( Y3 X+ i3 `' z: n2 l; Z9 T
% M" g, P( @+ z0 C, }
如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子7 `  n& K+ O  V. O$ C& v

1 Q) G' [+ }. e8 N' b- k一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
; z1 o6 B9 J4 F" n) S稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因