关于油红O染色

gqs2872022

1.染色的工作液现配现用，不宜久置。. k8 ^, L0 E* w
2.建议过滤工作液，能减少杂质使染色变得更好看。6 L" B+ Q$ J7 p) N1 {& h7 @
3.染色前需加60%异丙醇5min。
, D1 J/ i! C, O/ t" u- {% w4.染色时间15~20min。/ [8 [- u/ F+ B7 s. X/ L2 Y. H2 u
5.水洗，60%异丙醇分色，时间要恰当，不宜过久，过久估计全部都会掉。5 c4 ~9 k! N1 {3 P( c' H+ V5 b
6.苏木素复染可要可不要。

why121

最近也在做这方面的染色 根据成品说明书是用4%的多聚甲醛固定30min 然后PBS洗后 用3:2稀释的油红染色 但本实验室的显微镜不好 照的相感觉很差 想请教下你们用的是倒置显微镜多少倍还是用一般的光镜呢

zgzjhzxyj

油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中作为储备液,避光4度保存，用的时候油红O储液：蒸馏水=3：2的稀释。
+ ?/ e" e9 {1 J7 b步骤$ C, q& C* o; m, q% x, e4 I$ t
1、固定：吸弃培养液后加入95%酒精固定30min或以上
5 Q# ~& s+ C- c2、漂洗:吸弃固定液，PBS漂洗1次  A! g" V6 `6 B7 O; O* B) b' w
3、染色：加油红O染液染色10-60min4 l; N; l2 n9 G/ Q
4、漂洗：吸弃染液，PBS漂洗3次，尽量把背景洗干净，避免色素沉着
: l) m9 `0 v; w2 d) V2 Z/ h6 i& _5、拍照记录& \$ t3 e# q5 X% Q3 @
' n/ A! _7 @- i9 e/ p
注意：所有操作都需轻柔，脂肪细胞比较容易破裂，脂滴外溢
# j# s% n) s) Y4 D
- c3 c4 s) O$ u9 H8 J附图：* ~- ^# Z6 j6 o, V5 W' S

Learner

回复 zgzjhzxyj 的帖子6 t4 F" ]9 D3 m# u% C/ B

/ f  T; L& V* m6 q4 P9 ?* X好像一般不用乙醇固定吧！

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

menghy

我做过几次MSC诱导后的脂肪油红O染色，是需要过滤杂质。基本上都能染出脂滴的，没有经过苏木素复燃。

琛儿326

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6 N6 `6 P2 h6 N& j' G9 V7 M, r  {) T" s3 d& H
如果出现空泡是什么原因呢？

zgzjhzxyj

回复 Learner 的帖子
5 g+ _" Y$ X8 ]- b# D9 h
( N$ L/ M8 J* Q1 a. \一般固定液都选用“10%中性甲醛固定”，尤其是大的组织标本。但在细胞实验中，95%酒精固定效果也很好，既然酒精的固定效果能达到我后续实验的要求，那当然选择酒精啦，毕竟甲醛气味重，对人体毒副作用也大！！！俺们比较怕死

havie

油红染色时，直接使用油红染色，不稀释，可以吗  
" N. i3 b" h4 W5 m稀释后的油红，染色时，常会含有渣滓，有时染上了，颜色也较浅，不知是什么原因