脐带间充质贴壁法和酶消化法比较

taoqilh

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3 w' N; g# S' M$ t
我做过相关的实验，比较了在猪脐带间充质干细胞中各种酶的消化作用和贴壁法的效果，分享如下：6 M5 a) ]$ ]6 f- Z/ w
编号        处理方法                                  细胞出现时间         数量         形态1 O$ Z2 f) f9 g5 I) e
1        胶原酶Ⅳ（4h）+0.25%胰酶(15min)            7d                            少        成纤维样6 D& Z4 q2 J' n1 A" r" H2 ]# D
2        胶原酶Ⅳ+0.25%胰酶(1h)                           10d                         较少    成纤维样4 \8 v2 C9 Z' l) K
3        胶原酶Ⅳ，30 min                                             17 d                          很少        成纤维样  A/ [8 X5 w2 r) b# J
4        胶原酶Ⅰ+透明质酸酶(1h)                             4d                             多        成纤维样) _# q9 F1 G- \, ~( Z
在4法中，已经可以得到种类均一，形态良好的猪脐带间充质干细胞，但由于酶的消化作用对细胞可能产生不良的影响，因此，使用胶质贴壁法（去血管和外层包膜），以观察是否能得到更好的猪脐带间充质干细胞。
; H5 X8 ^! e% P1 O实验结果表明，通过胶质贴壁得到的细胞，在接种3-6d后，可看到围绕贴壁胶质组织生长的成纤维样细胞，形态均一，增殖速度较快，在形态上与胶质消化法得到的细胞无差异，但整体细胞量比胶质消化法少，待细胞生长到可传代的密度时，可见少量细胞形态发生变化，立体感下降有老化迹象，同时消化时间延长，传代接种后死细胞的量也相对较多。
7 @4 F! F  t$ i以上是我自己实验的结果，仅代表个人意见，呵呵6 {8 b! [) ]. v

zjjwiner

, v* j  |9 t6 w, r/ Y+ d5 P

, l' q4 v+ r9 P# @, j$ j回复 taoqilh 的帖子
# e1 d* r2 t* c( r
' L' \4 X8 W% A9 p/ N我做的是SD大鼠的脐带间充质干细胞的培养。用的时组织贴壁法，同样遇到了你所说的情况，请问你是怎么样解决的？能交流一下吗？

fm001982

感谢分享，受益良多。

回到从前

都做过，酶消化法和贴块各有各的利弊，消化法得到的细胞快，时间短，成本高。贴块法时间长，得到的细胞不一定是P0，纯度高，成本低，主要看血清怎么样，如果好的话细胞都不错 ，但是每一批次的血清差别很大，细胞影响的因素很多，一段时间好 一段时间形态不好

brian111

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7 G& }  y1 }3 S/ v- S/ f% c
0 }' `  r/ v8 x5 I不好意思好久不上。。我们都是买的商品培养基

yanmin

个人觉得贴壁法对细胞损伤小，虽然时间有点长，但细胞较纯，酶消化法有时候消化的不完全，细胞出的少

xuzhijuan1989

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- q: b0 G5 w; I' c( a4 ^
% x! W' j5 U# E4 Z- I1 w8 d/ ^你好，酶解法要怎么做比较好呢？