脐带间充质贴壁法和酶消化法比较

PENGMINLBX

个人感觉酶消化法有时原代细胞数量不太多     组织块贴壁法只要注意手法   七天就可以看见成状态尚可的细胞   15天多半可以传代培养   而且比较纯    爬出的细胞老幼不均的现象不太明显   而且可以省去不少本钱   减少外源蛋白的危险

happyending

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1 L; ^0 q7 n1 S1 N组织块贴壁法需要注意什么手法呢，我感觉组织块贴壁法爬出细胞不多（或者说是细胞爬出的同步性不高），有时只有2团，又不能让细胞长密，或者2团密了，其余都很稀疏，传代后数量不够，反而不好

山风

组织贴壁法：你可以先把脐带剪成2-3cm小段，然后用有齿镊先分离外膜层，让后分离三根血管，剩下的就是你所要的华通氏胶；或者先分离三根血管，然后再分离华通氏胶。总体需要多多练习！

PENGMINLBX

先把三根血管剪开  再减碎  减到足够细   我一般减十分钟   用勺子网培养瓶里接的时候  动作要轻  不要划伤底部   均匀排列    一般到十天 左右     或两星期左右   就能长出不少团的细胞  （ 当然有时也会不太多）   当见到大部分细胞状态良好时   就传代培养   不必等到都爬出来  那样就会有老的细胞

liucong

回复 brian111 的帖子0 A1 q6 ?' s3 o# m

' [9 p, E. t& s2 D3 F3 o用哪种培养基较好呢？

bsx1111

贴壁法相对简单,成本低，就是时间有点长

xingyuncao

传代前，接种的组织块该如何去掉？不用去么？

溜圆

胶原酶到底用哪种比较好呢？看到各种都有人在用。

溜圆

胶原酶到底用哪种比较好呢？看到各种都有人在用。

huajie881026

个人感觉组织块贴壁法较好，虽然时间长，细胞爬出时间长短不一，但细胞形态及细胞数量其实还可以的。一般10天左右可以看到形态不错的细胞，14天去除组织块，然后每三天换液，至28天传代，以后每14天传一次代，时间的确比较漫长。
* V! L4 }# ]+ \) X1 O' g1 t酶消化法我也试过，无论是单用胰酶，单用胶原酶，还是联合用，获得的细胞都不多，不知是我操作方式有问题还是这种方法本身的问题。。。