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楼主: easternliu
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PBMC掺杂红细胞会如何   [复制链接]

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发表于 2013-9-25 09:49 |只看该作者
补充资料, 在新加玻一所大学内有一学者做了一个研究, 发现在Wharton JELLY 内培养细胞时,  如果有一些红细胞, 在培养过程中有球捐出了血红素, 会影响细胞附在JELLY 上吸收养份. 这样的细胞活性会很低.
! b: d- j7 G" V; D1 H, Q% H
1 S; J! J( D* f- @所以他用了两个方法: 一个是: 用一台离心机加FICOL 来分离, 另一个是加美国产的一种溶液, 把红细胞压机降到10 两种成效也不错.
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发表于 2013-10-12 15:14 |只看该作者
这个一般没有关系,培养一段时i间,通过不也换液基本上红细胞就越来越少的
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发表于 2013-10-28 14:12 |只看该作者
若红细胞过多,影响在显微镜下的观察效果,之后的培养效果也会很差;可以用FICOLL在提取MNC时再分离一遍或是用红细胞裂解液将其裂解,这样虽然会增加操作步骤,但是会有有利于PBMC的培养
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发表于 2013-10-28 14:35 |只看该作者
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回复 easternliu 的帖子- C; K5 M3 n1 k9 J" M! ?$ p2 c

. ~4 b6 Y- f/ o# s掺杂红细胞一般会影响白细胞生长,由于一开始红细胞比较强壮,白细胞相对薄弱,你可以尝试分血当天先用少量红细胞裂解液进行裂解;培养4天左右或更一些时间(6天),可以将细胞离心收下来,用比第一次量多的红细胞裂解液进行深度裂解,这时候红细胞相对比较脆弱,裂解效果比第一次要好很多,同时白细胞的数量也有所增加变得相对强壮些,裂解液对其影响会减弱,如果一次裂解不太好,可以再次裂解。我都是这么做的,裂解效果不错,细胞长得也很好。
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发表于 2013-11-8 14:36 |只看该作者
回复 aaronbct 的帖子
: g% k1 ^+ x6 [; X* f0 V+ W$ \" I6 P5 n/ H0 b) k: H. F* L* t
能搞到是那种溶液吗?
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