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本帖最后由 taoqilh 于 2012-8-7 09:54 编辑 h8 r7 r4 ?% l" c
/ x/ [. a6 w$ D1 u! k我做过相关的实验,比较了在猪脐带间充质干细胞中各种酶的消化作用和贴壁法的效果,分享如下:
$ Q- i) \) v9 o6 n/ ~" [! n. ^编号 处理方法 细胞出现时间 数量 形态9 J: m) l0 y* u* i% G
1 胶原酶Ⅳ(4h)+0.25%胰酶(15min) 7d 少 成纤维样
+ P4 X6 c, u2 |! K- _2 胶原酶Ⅳ+0.25%胰酶(1h) 10d 较少 成纤维样
" m* V8 d, ], b8 r/ I) g3 f3 胶原酶Ⅳ,30 min 17 d 很少 成纤维样, t1 u- u1 w4 q: I* l) C
4 胶原酶Ⅰ+透明质酸酶(1h) 4d 多 成纤维样) ~$ A/ U, `2 k$ t, }7 `. B4 j
在4法中,已经可以得到种类均一,形态良好的猪脐带间充质干细胞,但由于酶的消化作用对细胞可能产生不良的影响,因此,使用胶质贴壁法(去血管和外层包膜),以观察是否能得到更好的猪脐带间充质干细胞。
4 ?8 x/ {! R5 C8 r2 Z* f l. n O实验结果表明,通过胶质贴壁得到的细胞,在接种3-6d后,可看到围绕贴壁胶质组织生长的成纤维样细胞,形态均一,增殖速度较快,在形态上与胶质消化法得到的细胞无差异,但整体细胞量比胶质消化法少,待细胞生长到可传代的密度时,可见少量细胞形态发生变化,立体感下降有老化迹象,同时消化时间延长,传代接种后死细胞的量也相对较多。2 r/ B2 I! g% f) }: E
以上是我自己实验的结果,仅代表个人意见,呵呵# A* y6 D( B9 n% @: s' U6 c; I
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