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楼主: 湖南干细胞
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脐带间充质冻存   [复制链接]

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发表于 2013-2-19 15:21 |只看该作者
不管是继续培养还是直接发放,在换液时冻存的细胞都不好。最好是传代后冻存。冻存配方可以试一下,每家用的都不一样。细胞复苏时,水浴应该都可以,条件允许的话用去离子水,最好是用酒精擦一下冻存管。离心时培养基应该用室温的吧,细胞你已经37水浴了,你再加入4的培养基。不知是为什么。
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发表于 2013-2-25 21:08 |只看该作者
血清90%+10%DMSO的配方或者5:4:1比较好,复苏水浴最好也是无菌水,酒精檫拭。
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发表于 2013-2-26 08:25 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-2-26 08:27 编辑
+ K5 p" m; f: U% b0 N# v: C, S0 Q
# V( j' D/ E  l回复 aiweieryezhi 的帖子
) W6 u" q$ G  \  e7 E: A9 c6 H
4 q( x1 r: u% \- i) e" n2 h因为在稀释时,用4℃稀释,那个温度DMSO对细胞的毒性比较小。常温下细胞毒性比较大。并且水浴融化后温度并未达到37℃。
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发表于 2013-3-3 02:11 |只看该作者
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回复 猩猩 的帖子5 e/ D! z5 ?8 q% p
6 M" J' b, V/ `7 E7 C5 X
再次看了你的回复,请问PE手套是包住冻存管再放入水浴锅吗?
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发表于 2013-3-4 17:39 |只看该作者
我们一般都是传代完后收获细胞冻存,冻存配方6%DMSO+6%血清+培养液。事先配制好冻存液,以防当场配制,DMSO放热损伤细胞。复苏细胞,一般我们会用培养液洗涤两次。
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