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[请教] 明胶溶液的配制   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-5-17 15:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问铺培养板用的明胶溶液是怎样配置的?我现在有的是明胶粉末,谢谢大家指点!

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包包
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沙发
发表于 2010-5-17 16:21 |只看该作者
一般干细胞培养铺板的浓度为0.1%,有些人用0.5%。用pbs溶解,水浴溶解彻底,建议用sigma的明胶。溶解后高压灭菌或直接过滤既可使用。
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藤椅
发表于 2010-5-17 16:24 |只看该作者
配制0.1%明胶溶液必须用无菌的PBS配制。注意无菌操作。无菌准确称量0.1克(配成100ml溶液)(可以把天平拿到超净台先灭菌),充分摇匀,过夜放置,然后无菌分装,4℃保存。
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板凳
发表于 2010-5-17 18:26 |只看该作者
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回复 3# labby + Z( D* e$ R; A5 X7 c8 q

) b5 d5 X/ n' ?: P
0 k, I0 W8 N6 j4 Z    为什么说必须要用无菌的PBS配置啊?我0.1%的明胶就是使用洗胚胎的水配置的,效果很好的。
+ c! C6 m" q( }" Z. u一般操作:5 Q" M1 M: z* y" q0 W2 Q7 S: j
1、500ml 的洗胚胎的水
, ]* |# w, J3 s% S2 M" U2、加入0.5g的明胶. O6 @; D# D9 K3 d( y& Z2 X9 V# o' [
3、56℃充分溶解$ n- Z8 Y7 v# x' m* z* O9 \
4、0.22微米滤器过滤备用
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报纸
发表于 2010-5-17 18:27 |只看该作者
刚刚忘了说了,水和明胶都是用的sigma的

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地板
发表于 2010-5-17 19:18 |只看该作者
我们是先配制1%的明胶母液,然后用时再稀释到你所要的浓度,0.1%或其他的。我们是用双蒸水配制的。
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发表于 2010-5-17 21:57 |只看该作者
前天刚配。0。1%,DPBS,明胶粉。。60-65度溶解。。趁热过滤,分装4度保存。
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发表于 2010-5-17 22:45 |只看该作者
学习啦 学习啦

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发表于 2011-6-19 14:33 |只看该作者
回复 labby 的帖子, G6 {& c$ c0 }
( V8 k2 J% g5 l2 B/ T
我用PBS配制的明胶后,经过高压灭菌后,为甚么呈现浑浊样呢?还能用吗?
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发表于 2011-6-20 17:49 |只看该作者
用双蒸水配的2%明胶为什么不凝固?
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