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[请教] 明胶溶液的配制   [复制链接]

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包包
-5  
楼主
发表于 2010-5-17 15:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问铺培养板用的明胶溶液是怎样配置的?我现在有的是明胶粉末,谢谢大家指点!

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包包
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沙发
发表于 2010-5-17 16:21 |只看该作者
一般干细胞培养铺板的浓度为0.1%,有些人用0.5%。用pbs溶解,水浴溶解彻底,建议用sigma的明胶。溶解后高压灭菌或直接过滤既可使用。
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藤椅
发表于 2010-5-17 16:24 |只看该作者
配制0.1%明胶溶液必须用无菌的PBS配制。注意无菌操作。无菌准确称量0.1克(配成100ml溶液)(可以把天平拿到超净台先灭菌),充分摇匀,过夜放置,然后无菌分装,4℃保存。
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板凳
发表于 2010-5-17 18:26 |只看该作者
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回复 3# labby
. t8 C: x9 D  J9 i6 F! U9 p$ I6 z" l4 x7 f+ g
  a+ p! D0 F( f3 u! s
    为什么说必须要用无菌的PBS配置啊?我0.1%的明胶就是使用洗胚胎的水配置的,效果很好的。( x: _/ b* u3 i) O& e6 g9 |
一般操作:* ^. q8 N1 c( V. {8 S7 n" ?
1、500ml 的洗胚胎的水
! Q: [% U+ Q+ D* t1 U: B& H2、加入0.5g的明胶- e$ w- B6 M( z& @. S8 @4 G
3、56℃充分溶解
7 H' v, q* w% C& _8 }+ o  |4、0.22微米滤器过滤备用
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报纸
发表于 2010-5-17 18:27 |只看该作者
刚刚忘了说了,水和明胶都是用的sigma的

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地板
发表于 2010-5-17 19:18 |只看该作者
我们是先配制1%的明胶母液,然后用时再稀释到你所要的浓度,0.1%或其他的。我们是用双蒸水配制的。
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发表于 2010-5-17 21:57 |只看该作者
前天刚配。0。1%,DPBS,明胶粉。。60-65度溶解。。趁热过滤,分装4度保存。
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发表于 2010-5-17 22:45 |只看该作者
学习啦 学习啦

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发表于 2011-6-19 14:33 |只看该作者
回复 labby 的帖子
, U: P( r0 b" J! g- {" |
+ g' f( {* _$ E# _6 v6 S我用PBS配制的明胶后,经过高压灭菌后,为甚么呈现浑浊样呢?还能用吗?
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发表于 2011-6-20 17:49 |只看该作者
用双蒸水配的2%明胶为什么不凝固?
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