hESC conculture with op9

大漠

hESC conculture with op9
9 _- ~( M) C5 F$ \4 o& k' W' [! e我在做人的胚胎干与OP9细胞株共培养诱导造血分化，做了几次均失败，主要是培养到4-5天时OP9细胞状态就变得很差，直接导致分化克隆坏死脱落。原因不知道？细胞株均是从美国买回来的，方案也是按照文献上的报道做的。敬请各位有经验的师兄师姐给予指导。谢谢！

大漠

和大家分享一下成功的喜悦。主要是培养基的问题，必须使用不含核糖核酸和脱氧核糖核酸的a-mem培养基，血清也要使用HYCLONE的特级血清。否则养出的op9细胞肯定用不了。我已经做成功了。

大漠

不好意思，最近忙，没有上网。我有ATCCop9，状态不错。但是还是出现以前的问题，希望有高手提供点经验。我怀疑可能是HES细胞株的问题，但是，我手头只有一株细胞。楼上两位的HES细胞是哪个细胞株？我们可否交换？谢谢！

大漠

版主，您好！你讲的注意事项我基本都注意到了。我的op9是才从ATCC买回来的。状态很好。a-MEM是现配现用。FBS一直用的都是20%。可就是op9只能维持3-5天，从第2天就看到状态变差，最后，细胞就完全脱落了。根本没有办法做下去，按照WILcell protocol应该可以维持到14-21天。所以实在没招了，才想到是否由于HES细胞株有影响。敢问斑竹用的是哪个细胞株？能否向您请教请教，我的QQ393064897.谢谢！

大漠

这是我培养的op9细胞。状态很好。由于实验需要，恕不免费赠送，若愿意，可以用hES交换。