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请教DC细胞培养问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-8-11 15:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近培养的DC细胞在贴壁培养24小时后出现大量黑色渣滓,贴壁的DC细胞也几乎全部飘起,2天后DC细胞全部死亡,有没有高手帮我分析分析原因。DC细胞贴壁时间1.5h,加GM1000U/ml、IL4 400U/ml、自体血清5%(56度灭活),这个体系之前做过很多份样本,只是最近遇到这种问题。

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沙发
发表于 2017-8-11 16:11 |只看该作者
附上拍摄的照片
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

藤椅
发表于 2017-8-11 16:43 |只看该作者
我说就不要加自体血清了,换成Xvivo-15,GM和IL-4都加到500IU/ml就ok,贴壁时间可以适当延长,过夜也可以的~试试看6 W  z1 F# s; X' I2 n: n! Z
如果之前重复多次没问题,很可能是这一份样本质量不好

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板凳
发表于 2017-8-11 17:48 |只看该作者
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回复 baby00000003 的帖子
5 g7 Y" n/ z1 l9 v; V9 Z% m4 [+ T* N  H0 L# g8 D
请问Xvivo-15是什么东西?谢谢

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报纸
发表于 2017-8-11 17:49 |只看该作者
回复 1538238029 的帖子
+ {/ `) B$ N( f9 n: E6 e+ `
2 m0 I, d7 g$ h, A: q: i有没有可能是移液管外侧掉下的喷漆,就是刻度那个?

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包包
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地板
发表于 2017-8-14 14:43 |只看该作者
回复 anzhida0823 的帖子
& ~: u6 i7 N  j5 |. _- r8 j8 L" l
# |) S& \2 u% u培养基

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发表于 2017-8-14 15:10 |只看该作者
回复 剡溪兰客 的帖子
$ c6 M" `( F: s4 j. [! l1 Z& K9 k: h8 h% r1 x$ ^/ b$ W8 B7 J8 ]
恩,谢谢!

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发表于 2017-8-16 11:27 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子
) y' D9 y, y2 ]% _) T6 t- d0 ]- Y1 i7 b1 m9 g6 j6 j9 j
自体血清真的很脏,后面一份样本单独培养了一下血清,瓶底都是渣

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发表于 2017-8-16 11:29 |只看该作者
回复 anzhida0823 的帖子5 J4 _2 l7 e* R( f! A

1 h6 f% t5 P" A) E不是喷漆,镜下观察是类似于细胞凋亡形成的残骸,而且喷漆不可能掉这么多的

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发表于 2017-9-18 16:47 |只看该作者
这样看很像污染吧,对了,你是分离的什么来源的DC呀,为什么要加自提来源的血清,我们就加的GIBCO的High-Inactivty的血清咧
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