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本帖最后由 wagumaxida 于 2012-5-17 20:56 编辑
+ b, ~' T, L0 v$ H( ~# }6 t5 U# ?, M$ k; @" _
主要有几个问题亟待解决
$ B& F2 n% I% O) h1.外周血分淋巴细胞时,梯度离心去除血小板时,离心梯度是怎么设置的?
8 S. v0 L" }' H9 z, h3 p5 u$ ]2.淋巴细胞贴壁获得单核细胞时:( @6 p! S" U3 T( C1 I+ V+ s; @
A.贴壁时需要加血请吗?需要加细胞因子吗,需要的话加哪些,量是多少?- I+ j" o3 r& g' s: P& P
B.贴壁时间是多长时间,2h还是48h?$ u/ Y2 c* n* [2 \! x5 n4 P0 x( B
C.贴壁时是在培养瓶中好还是在六孔板里好?
7 n0 g: O ~ g- D/ |5 n* S D.这一步还有什么要注意的吗?
* Z/ x- C. r9 ]" j8 \+ f3.单核细胞诱导培养成未成熟DCs这一步:
5 L8 y4 M" a s% C A.换液间隔怎样?半量换液还是什么其他方式?
" h8 A" }1 q: ~& z1 u2 t$ J6 r B.换液时所用培养液中因子的量是多少?
! |3 E1 N( } }) r/ X6 S) F4.未成熟DCs诱导成为成熟DCs这一步:
+ @) W5 g" C" G# I$ z3 g3 M A.在第几天开始诱导?- v3 a; S! T$ q! d) x6 {
B.用什么因子或者药物进行诱导,量是多少?
9 ^1 @' i6 T8 `2 u9 M y C.诱导时还要继续添加GM-CSF、IL-4之类的吗?
7 _8 F0 X, [0 y& V3 R D.诱导多长时间可以收获?" O( G+ t! Q7 x0 V: j- I3 m3 [
P.S. 如果要用荧光腺病毒感染的话,在第几天哪个阶段感染会比较好?
$ _5 k# k, w8 d% i) `& s7 J9 m, Q* s: U) B4 K
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