哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

echowdk

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最近想要做一批。提前谢过。

牙牙丫丫123

1．取材/ A. J2 @# V1 c, m1 [9 h! }
取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。
2 ^$ E. ]8 R; e5 t6 q; r- P1 Z2．材料处理       
5 u9 P2 s  H/ I( z4 ^（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。" _3 _) c# Y8 W0 b
（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。
1 ]3 A2 v  E! q! `8 Q% @（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。' {5 y% _) Y0 T3 a! Q$ h1 W
3．细胞培养
9 G% T! W; F2 u# U$ P' G/ p: G' z（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。' ?( ^3 A( w$ |/ G: L4 R$ k- V  \, @4 U
（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。
2 f' `1 U& }: M8 W5 k（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。2 m( T1 r  E/ B& f. n
（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出' M% Y( u. d$ v6 ^, v! r9 a3 ~1 Z