精原干细胞建系后marker验证

20111109

9 ~9 H- G* S( D8 X
9 V! w: t( ]1 P5 q; Q4 V: g0 M% B$ J5 y4 V
如上图显示的，我验证了PLAF  OCT4 stra8 C-kit SSEA1等! H( z  Q- F' X0 B; g; @0 }9 X5 x
我想问的是
- u  t7 }. j$ H: t1、理论上，这些marker分别应该定位在哪里（核或质）6 T9 i7 Y. n2 j9 W9 ^! P8 ~
2、这些marker分别在什么情况下表达（即哪些是未分化SSC表达的，哪些是分化SSC表达的）
9 V+ T0 b+ _7 e) c7 I9 U& M3、有没有关于SSEA1的文献，比较新的，我对SSEA1了解很少。
' p8 P9 ?# }) f4、C-kit 的抗体哪个公司的比较好？有没有人做过的。
  _! }3 Y8 w( M0 D. y刚接的课题，刚建的细胞系，各种懵懂，先谢过各位了~~& V8 D8 Y9 i! k. E8 v! r

$ I; V9 k4 _6 }+ t2 V+ l- A+ u% f; h) I7 H  V- L" h

20111109

回复 jialiyang 的帖子) v7 i2 H2 K& h3 l7 g# ]
) t$ r$ @+ r5 [1 A
抗体说明书里面做的荧光许多都是在非干细胞里面做的，不知道有没有参考价值。。。

20111109

回复 bj123 的帖子! A7 C) [3 ?/ e4 M% g0 b& \$ \( D
( E* W8 I5 L9 D7 W
嗯 C-KIT也是一个膜表达的蛋白，我做的这个结果是在核的。所以我觉得也许是因为C-kit 和SSEA1的抗体不行，而且本来我做的这个验证预期结果也是C-kit和SSEA1不表达的

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9 K) ~1 I& ]" X3 d- e9 w/ i

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回复 moluxingke 的帖子; H) ~' F; Y0 }/ `& T0 a

2 f9 G6 x+ e- {, Y9 @0 d) l抱歉 我把40X的图原图放上了~~

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回复 zhangyan813 的帖子
, J  I( t. i" i3 j7 V0 b# S, X0 l1 F
6 Q7 F/ i8 A3 a/ l6 @" S3 C, _1 e感谢您的答复~~! V$ y& V0 r" _8 s( B* T. E
我做的是小鼠的SSCs，因为我是第一次建系，第一次做milicell，所以什么都不知道的情况下就做了，(⊙o⊙)…实验还是应该了解全面再做的。# D2 u' a2 q6 T! ], I& @
您的建议很对，核定位要做个triton打孔。4 u  O" r/ e, }4 y2 f
但是，之所以染C-kit就是想判断培养的SSCs是否发生了分化。。。文献里说未分化的SSCs是不表达C-kit的，因此做了。

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stra8 是表达的，C-KIT显示核上有荧光，但是荧光不是很强。可是C-kit不是应该在膜上么？第F5代

20111109

回复 w343989328 的帖子8 m4 M! g* l1 ~% ^# E6 F
) I, G- N# ?  W" P: `" B* R
1、贴壁不牢的问题：我底下还是种上MEF的。7 R$ }' s- j5 z5 [3 A8 M! q# `
2、PLAF下没有透化，RD AF2944

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回复 w343989328 的帖子% {: f  C( _: p
. m3 ^/ e: o& D" \% V
no 是shinohara 的

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回复 tangruiling1973 的帖子' t+ f$ Z, S/ [# t7 R9 M

7 J9 K  @& z; J1 r% ^; y5 j( W) a0 C1%~~