KSR+2i养mESC

scottist

最近在使用KSR+2i+lif的培养液培养mESC，没加MEF，结果发现大量细胞出现分化，请教各位，这个试剂组合也也必须加入MEF么？谢谢。

小等

应该不用加MEF吧，这个不是feeder free的么

scottist

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1 e, R! w/ Z* L2 Z, ~9 G7 v: A8 O- h: {) x9 H: G$ p/ f# K
是啊，大家都说不需要加MEF的，但是效果确实不好，不知啥原因，可能是细胞状态本来就不好吧。

lp0030

KSR换成血清会好，只是不知道血清是否影响你的实验

scottist

回复 lp0030 的帖子2 d' r+ _7 b* ]. [
/ [- V% r5 R6 d4 U* n! O
你的意思是将KSR换成血清，可以不加MEF，正常培养？

lp0030

回复 scottist 的帖子3 L- _+ d8 x- N+ J% C

- Z% a9 F6 o+ ]( {% Q是的，小鼠ES，LIF+血清+PD就可以了，chir也不用

scottist

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+ F: u4 n* Z& e; p# N
0 }( p1 S* d: I0 `2 S请问血清是用的ES级别的，还是一般的Gibico的FBS就可以？

lp0030

scottist 发表于 2014-9-16 16:34 2 J8 ^4 S! {9 S
回复 lp0030 的帖子7 s5 R% n" M! m' o; i* Y  U% k. ^
" E5 G* G' w5 t( v: n" B8 t
请问血清是用的ES级别的，还是一般的Gibico的FBS就可以？

* `. e% m' N* [) EGIBCO一般的FBS就可以了
- c$ |7 n) ~2 V8 B2 v

scottist

回复 lp0030 的帖子/ |: f% f6 ?; n2 H
; U1 f9 n- H4 E8 b' X
非常感谢您的指导！

lp0030

scottist 发表于 2014-9-16 16:52 0 l9 A8 c' w7 b  s7 N
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4 v% Q8 F- j* l  N' T' ]% G
7 A3 G8 S' J, \' ]0 i' ~3 S非常感谢您的指导！

4 y. P3 @3 x% H1 k4 a$ {' p4 e- ]看了你发的其它帖子，提一下基础培养液用DMEM就行了。另外，你的mES不知道是什么品系小鼠来源的，如果是129的话，就是血清加LIF，其它品系用LIF+血清+PD 和/或 CHIR