大家冻间充质干细胞的时候冻存液比例是多少啊？

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回复 yinchong42 的帖子% W5 t5 {4 a! k# X9 S

) p' ~$ r# A/ e' \好的，我试试，谢谢啊~以后可不敢用PBS复苏离心了...

yinchong42

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$ T3 o- |5 n9 D+ |* ^- e! x
; p6 K$ m) D3 e0 X+ Q% G" Q四季青的就行，你要是想图便宜就用免疫组化的山羊血清，想再便宜点就买100+的马血清，反正又不是养细胞，维持住渗透压就行

yinchong42

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0 x0 m  t# L; c0 A& y
( ?+ }) i, ?3 b9 N; y& E至少我在复苏细胞的时候经验是，刚刚复苏时培养基渗透压越高越好，所以血清要多，如果你的细胞比较容易死，那么就在复苏时直接把冻存液加到大量（至少10ml）的高血清培养基里，不需要离心，先养到贴壁了再换液

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回复 suning5 的帖子/ t$ w8 r5 T* ~* c& ?

1 I' o* F! q$ Z+ |3 Q/ F现在血清贵的不要不要的啊，gibco不是10K+才500ml么...

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( l" u) g# I2 \6 J- _
% i: V& C+ r, B恩，想问下你知道为啥不放双抗吗？查了下没查到...有人说没影响有人说最好别放...但是具体为啥不放也不知道

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回复 fm100200 的帖子
( k) e/ W( Y' A% G
! l+ D# x7 l; ]  x" \- X1 y3 t- ^不用血清吗？能行吗？你冻的是啥细胞？

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回复 yinchong42 的帖子: [1 g( G6 q) n: p# j! O; ~
" c& a* I/ `# J5 c
恩?复苏细胞死的不是因为没冻好吗?一直以为复苏在培养液里是为了平衡渗透压,所以用的PBS...难道是这里的问题？

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回复 yahooyeah 的帖子
2 l  A/ f! p, X8 B6 l/ C# l7 q: j, }3 Z
恩,我打算提高下血清浓度了

suning5

血清贵毛？均分至每管，花不了多少钱。血清最好达到终体积一半

维维睡啦

你的FBS量太少，想省钱的建议用DMEM：FBS：DMSO=5:4:1的，这个比例还是比较好的，用的也比较多。培养基别加双抗的好，可以适当提高一下冻存密度。