【CHO无血清培养基   用途与描述】

培养基适合多种不同来源的CHO细胞株，如用于Lonza来源的GS-CHO细胞的培养及重组蛋白生产，也可用于Gibco来源的 CHO-S 细胞的培养及重组蛋白生产。也适用于重组蛋白研究用途。

 

   CHO无血清培养基    NC0302     1000mL/瓶       2-8°C保存      效期12个月

 

（特别说明：本产品不含 L-谷氨酰胺，对于非GS系统的细胞，使用时需加入 终浓度为4 mM 的 L-谷氨酰胺。    不含次黄嘌呤和胸苷（HT），在培养二氢叶酸还原酶缺陷型（dhfr-）细胞时需要额外添加，推荐添加浓度为13.6 mg/L的次黄嘌呤与3.87mg/L的胸苷。）

 

【CHO无血清培养基   产品优势】

1.无血清，低蛋白；

2.采用批次培养，CHO最大生长密度可达9.0x10⁶cells/mL;

3.CHO细胞自接种开始至培养最高密度仅需要3-4天；

4.培养基适合多种不同来源的CHO细胞株。

 

【CHO无血清培养基   产品性能】

 一、GS-CHO细胞株在Yocon培养基及Hyclone培养基的生长对比数据

细胞株：所用CHO细胞株为LONZA公司来源的生产级别的工程细胞株；

对照培养基：为Hyclone公司的HyCell CHO培养基，产品货号为SH30934；

培养形式：采用125mL摇瓶批次培养的方式，培养条件为5%CO_2，转速为120r/min。

最大生长密度：Yocon培养基中，第4天达到最大生长密度 9.08x10⁶cells/mL；

                     Hyclone培养基中，第6天达到最大生长密度1.118x10⁷cells/mL。

细胞倍增时间：Yocon培养基中，第4天即达到了细胞密度峰值；

                    Hyclone培养基中，第6天达到 细胞密度峰值。

细胞活率：培养过程中，细胞活率稳定维持在90%以上

 

二、CHO-S细胞株在Yocon培养基及Hyclone培养基的生长对比数据

细胞株：所用CHO细胞株为Gibco公司来源的CHO-S空白细胞株；

对照培养基：为Hyclone公司的HyCell CHO培养基，产品货号为SH30934；

培养形式：采用125mL摇瓶批次培养的方式，培养条件为5%CO_2，转速为120r/min。

最大生长密度：Yocon培养基中，第4天达到最大生长密度 9.15x10⁶cells/mL；

                      Hyclone培养基中，第5天达到最大生长密度1.113x10⁷cells/mL。

细胞倍增时间：Yocon培养基中，第4天即达到了细胞密度峰值；

                     Hyclone培养基中，第5天达到 细胞密度峰值。

细胞活率：培养过程中，细胞活率稳定维持在90%以上

 

三、GS-CHO细胞，从其他培养基转入Yocon培养基连续传代情况 

GS-CHO细胞从Hyclone的培养基中培养，后接种至Yocon培养基中进行培养：

GS-CHO细胞，转入前HyCell CHO培养基的生长状态，可见有一定比例的“巨型细胞”	GS-CHO细胞，转入Yocon培养基后生长状态，细胞大小相对均匀，圆润透亮，分散良好

GS-CHO细胞从Hyclone的培养基中培养，后接种至Yocon培养基连续培养4代，细胞生长持续稳定：

四、CHO-S细胞，从其他培养基转入Yocon培养基连续传代情况

CHO-S细胞从Hyclone的培养基中培养，后接种至Yocon培养基中进行培养：  

CHO-S细胞，转入前HyCell CHO培养基的生长状态，细胞大小不均匀，有碎片。	CHO-S细胞，转入Yocon培养基后生长状态，细胞大小相对均匀，圆润透亮，分散良好。

 

CHO-S细胞从Hyclone的培养基中培养，后接种至Yocon培养基连续培养4代，细胞生长持续稳定：     

    

                 

【客户经常提问的问题】

Q: 使用CHO无血清培养基较传统血清培养基有哪些优势？

A: 传统血清培养基中加入了动物血清，首先血清的价格高昂，其次血清的成分十分复杂，很多成分不明晰，而且由于来源问题，批间差异很大，存在病毒、支原体等微生物的污染的风险，会对后期实验带来损失；CHO无血清培养基采用血清替代成分，避免了使用血清带来的问题，成本也更低、更加安全，为后期工作提供了便利。

 

Q: 使用Yocon CHO无血清培养基培养细胞的生长情况如何？

A: Yocon无血清培养基培养的细胞形态规则、分散良好、生长速度快，培养4天左右可达到高细胞密度可以达到 9e6 cells/mL，不同细胞株高密度可能有所不同，细胞活率在90%以上。

 

Q: 以前使用培养基加血清的方式或使用其它品牌无血清培养基，可以直接转到Yocon无血清培养基中培养吗？

A: 通常情况下，在传统血清培养基中培养的CHO细胞或者在其他无血清培养基中培养的CHO细胞可以直接传代至Yocon CHO培养基中进行培养。个别情况下，直接替换为Yocon CHO培养基后细胞不能正常生长，具体表现为传代后细胞状态变差，死亡率逐渐变高，形态不再呈现规则的圆形。这种情况下，建议改用逐步替换的方法，具体操作见操作注意事项：细胞适应方法。。

 

Q: 使用CHO无血清培养基培养细胞时细胞接种密度多少合适？

A: 推荐接种细胞密度为0.3-0.5e6 cells/mL，实际测试接种密度可以低至0.15e6 cells/mL，但此密度下细胞前期生长需要一定时间，为避免时间的浪费，不建议接种密度过低。

 

Q: 为什么我试用你们公司的培养基，细胞大密度达不到9e6cells/mL？

A: 一般加血清的方式培养或使用其它品牌无血清培养基培养的CHO细胞在换用Yocon无血清培养基的过程中，可以实现直接替换（即细胞直接转入到我们培养基中可以正常生长）。但是“直接替换”并不等同于“完全适应“。更换后第一代，细胞先需要适应新的培养环境，并不能立即体现出其实际的培养性能。更换为我们培养基中后，连续传代2-3次，一方面可以去除原培养基残留影响，另一方面细胞可以完全适应至我们的培养基，即可实现高密度。

 

Q: 为什么我的CHO细胞在长至大密度后再次接种，其生长会变差？

A: 细胞在达到大生长密度的时候实际已经开始衰退。所以在大密度传代，细胞接种后并不能表现出良好的生长，往往需要2-3天的时间逐渐恢复状态。要保证种子细胞一直处于良好状态，一定要在其处于对数生长期时进行传代。