请问脐带间充质干细胞为什么没有细胞爬出？

zsykdx

用组织块培养法原代分离脐带间充质干细胞，但是最近偶尔会出现没有细胞爬出的情况，请问一下这种情况出现的原因是什么？可以解决吗？谢谢。

yooung

1.估计与脐带的质量有关系：1是足月龄婴儿的脐带，还是早产婴儿的脐带？2.脐带的运输温控和保存介质.3.从剪下脐带到处理脐带的时间长短？  Q5 y- f, a! c
2.SOP：每次组织法培养的操作是否严格按照SOP完成的。4 z+ o3 ?* G+ r& F
3.培养基批间差：有时不同的批次培养的效果不同。  o" y) Q& O& b8 g3 _8 C
我能想的可能性就这些了。

shellyanlanlan

培养多久了，我们是一周左右的时间才有细胞爬出

游遍芳丛pine

这种情况是有的，操作没有问题的前提下，脐带本身的质量很重要：
1 K7 ~0 L# A1 m. E3 z6 f8 ~1、脐带的保存条件要适当，一般采用等渗溶液加双抗，4℃保存；
* h: m+ ]. v7 g* r2、时间不宜过长，36h内比较好。, N# A- `+ W; P/ B

jddakui

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1 o* R) t! t% i( e' g8 s% P, Z  i5 ?1 u0 h
36小时，组织块培养会有影响吗？你们有做过TEST吗？

王苍金

原代多长时间了，一般一周左右细胞爬出，由于个体差异，也有十一二天才爬出细胞的，看着换液就好。但是要确定没有污染，组织块禁止频繁移动。

游遍芳丛pine

回复 jddakui 的帖子" ~  X2 E8 K$ \* e& I8 _8 Q: S

( `' a  a! C7 k) k" |按道理36小时健康的脐带是没有什么问题的，我们做过时间最久的脐带是48h左右的，大概10天左右也可以正常爬出来。如果脐带保存条件没有问题，可以考虑是脐带本身的问题了。这种情况还是有的，所以必须是由正规渠道获得的健康脐带。

jddakui

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! G, T& O) t* P3 S  h
0 y' s. J9 W5 `6 Y7 O) Z加双抗的PBS或者生理盐水都可以吗？需要特殊保存液吗？

游遍芳丛pine

回复 jddakui 的帖子( {1 i# W- S. D! f) X! b5 Y
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我们使用DMEM

jenny114402

回复 jddakui 的帖子9 B/ E* X( I+ U+ _; o2 R- Y2 c) w
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我们一般2-4h，最多也就过夜，然后脐带看起来就不那么饱满。