脂肪干细胞需要红细胞裂解液吗？

jddakui

做脂肪干细胞培养，有些血管很难分离，酶消化后 离心底层沉淀是红色，需要红细胞裂解液处理吗?对细胞有没有损伤？

ytumuyangren

我们做的时候，将脂肪组织剪碎后用PBS多洗几次可以减少红细胞的残留，即使有少量的红细胞不会影响脂肪干细胞的增殖的，在后续培养过程中通过换液，消化细胞传代就可以除去掉红细胞。最好不要用红细胞裂解液，再温和的裂解液都会对细胞膜有损伤。

木头1102

我觉得没有必要，培养一段时间，红细胞就裂解死亡了

yaolinzhang

回复 jddakui 的帖子7 u, V% ~, U/ l

) u5 e4 n) ?1 s不要反复裂解，裂解一两次，掌握好时间还是可以的

lgfffancy

回复 jddakui 的帖子; t: W) E1 F' S! G9 U

) F6 `  ]' {& M& @% G: F$ a不需要用，培养过程中红细胞自动就消失了。

jddakui

回复 ytumuyangren 的帖子1 C' V$ F0 j  {- h" F5 l
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你们一般原代培养多久？传代后T75铺满，细胞能有多少？
2 W; R  z% Q+ A! U+ C/ S

ytumuyangren

回复 jddakui 的帖子) ]% d- T. {' T8 A
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原代一般是8-10天，T75长至80%传代，细胞数目在3-5*10的6。

jddakui

回复 ytumuyangren 的帖子
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! q) u1 I2 K" ~/ d" R4 F! {3 U谢谢

沙漠狐o0

红细胞裂解液能不用就不用吧。。。
& ^, j; i& @; O; `7 n, d" u换液2次基本上可以去除红细胞了。。。

淘知路遥

脂肪做之前要清洗几遍至无血丝