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一般做脂肪干细胞分离时,通常用几型胶原酶消化? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2016-1-21 15:36 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2016-1-22 11:51 编辑 1 x0 B" Q0 W" d5 j4 _

  U6 E- O6 T- ~, R  Y" ~9 g4 D- x3 C一般做脂肪干细胞分离时,通常用几型胶原酶消化?浓度是多少?消化多久?有谁做过此优化实验的吗?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2016-1-21 15:49 |只看该作者
0.075%的I型胶原酶37℃、消化1h,离心收集沉淀,计数、接种培养瓶、36h后换液,后续正常培养、传代等。
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藤椅
发表于 2016-1-21 16:20 |只看该作者
0.1%I型胶原酶,与脂肪组织1:1混合,37度摇床,200r/min消化45min,之后800g/min离10min,沉淀DMEN重悬,100微的筛网过滤,计数后接种培养瓶。视细胞密度状态换液传代。
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板凳
发表于 2016-1-22 13:22 |只看该作者
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结缔组织I,III型;
4 f, V6 Q0 M) A+ y, G5 b骨组织、脂肪组织I型;9 u" \! Q) u$ f* c
软骨组织II型;+ T  o1 O1 t; x
胰岛细胞IV型。
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报纸
发表于 2016-5-11 17:03 |只看该作者
亲,消化时间,酶浓度一般是要看你的实验对象的。大鼠的,我用的是0.2%I型胶原酶,体积是脂肪量的两倍。附睾脂肪,消化约40min,腹股沟脂肪,消化约50min-60min。
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地板
发表于 2018-5-30 09:05 |只看该作者
I型,0.075%浓度按照1:2,37°摇床消化1h

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发表于 2018-6-1 12:01 |只看该作者
上海张江企业寻找脂肪干细胞操作人员。15800485233。

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发表于 2019-4-9 10:39 |只看该作者
回复 田甜 的帖子" f- ^0 X1 r. Z; h

% d: F; M6 i5 f- c: H* T小鼠的也是一样吗,请问小鼠3,4周的会不会太年轻了,提取出的细胞不太好生长
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