慢病毒、腺病毒操作安全性问题

lxy07

实验中考虑应用腺病毒或慢病毒，网上说慢病毒有潜在感染实验操作人员的风险，腺病毒则小很多，是这样么？另外，腺病毒和慢病毒分别需要什么样的实验条件呢？请各位支援，非常感谢！

lxy07

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7 \/ t0 z" h8 N8 r$ k- K3 Q# U9 e' \
6 v) k/ Z" @* R7 q, F% i" m自己顶下，有网友说，腺病毒的免疫原性较强，很多研究人员在操作腺病毒后会出现感冒症状。而慢病毒是基于HIV改造的一种缺陷病毒，几乎没有免疫原性，虽然理论上慢病毒只能感染一代细胞，但是这是一种整合型载体，可以主动整合入基因组染色体稳定表达的载体，所以其安全性很难说。是这样吗？

yaolinzhang

回复 lxy07 的帖子6 j6 a* D  X* V* i( D
2 R2 v9 c; h9 x3 r
如果做原癌基因，风险是存在的。建议楼主最好在生物安全柜中操作。

lxy07

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0 d5 ]( @  C. O/ p
& `0 ~( A# Q& J) @' i$ }有生物安全柜，但是实验条件是普通的房间，不是洁净空间，没有负压系统，行吗，废弃物该如何处理啊？

yaolinzhang

回复 lxy07 的帖子+ Z9 [* s: F$ q# p) J
, g( x9 a% H: _' o) R; Q0 c) G
原则上慢病毒操作应满足二级水平：
& Y' u& y( Y( `: b' S+ RSummary of Biosafety Level 2:" L8 c5 D5 q) |& a0 g7 g2 \3 T. P
Practices:
: N! Q/ D" W; J# O  }& x6 Q  Standard microbiological practices
) f8 p# _3 x" U+ @; o  B3 y. A  Limited access to work area2 T8 E/ ~. d. M' h8 y' q7 a* u
  Biohazard warning signs posted6 J1 \) I/ c" `
  Minimize production of aerosols
; z# _7 x8 j! T  n) ]5 Z  Decontaminate potentially infectious wastes before disposal
3 v/ M! ~& `  ~9 [  Use precautions with sharps (e.g., syringes, blades)
1 s$ _/ B$ [$ B! K  Biosafety manual defining any needed waste decontamination or medical surveillance
, ?9 z( B4 ]" {5 p9 y% N! \policies
) p" b% G: R; o- e2 LSafety equipment:
$ P% A! l5 Z8 x' O9 E" G, A  Biological Safety Cabinet, preferably a Class II BSC/laminar flow hood (with a HEPA - k0 c* @; ^. C) O1 S% }0 s* p2 G
microfilter) used for all manipulations of agents that cause splashes or aerosols of infectious 9 {1 k- D) s6 X: j8 Q
materials; exhaust air is unrecirculated, V' C6 I# I$ S5 J
  PPE: protective laboratory coats, gloves, face protection as needed ! j2 n0 N9 R, c2 g; f9 F
Facilities:7 ~( \! `( s; S0 M4 C
  Autoclave available for waste decontamination* H! p; G& h# K- ]( }
  Chemical disinfectants available for spills
; O% t/ Y. o& r    不过总比超净工作台强，建议楼主将用过的枪头、培养液集中收集于装有84的容器内，密封。过夜后，高压处理即可。

zmfang555

慢病毒载体的骨架一般是HIV，因此感染途径和HIV类似，即主要为经血传播，因为是工程化的载体，剔除了自我复制的基因，大大提高了安全性，但理论上还是存在感染的可能性，虽然这种可能性非常低，慢病毒的制备还是必须严格遵循bsl-2的规范。