我的H7发生分化了吗，求解

fululu

请问是确定发生分化了吗，细胞买来传了4代就这样了，什么原因呢？

2016-2-11 11:08 上传

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wwy551

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: w. F, E2 R! Y; O% D是分化了
- N* `; b" b9 e' M  e+ @" F# n可能你用的MEF feeder不好，也可能bFGF浓度不够6 a- o" p2 j: Q/ |1 r9 w
所以可以考虑重做原代MEF，以及适当提高培养液里bFGF的浓度

fululu

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) J, T+ ]: b( y7 l+ V
& }' ^7 z: r2 E: i& }$ _1 s我用的是metrigel 铺板。培养基用的是买来的E8。昨天传代，今天发现细胞大多细胞死了，是不是我用的vesene消化液导致克隆太小了？

风云动

密度有点大
. Y, D7 h/ P* k6 E% r" l8 T

wwy551

回复 fululu 的帖子; _9 @3 N0 M  ]" w) E, t
3 }" _8 F+ l% o5 t- w
分化应该跟怎么消化关系不大
  M1 X4 U# T: r9 j6 ], n1 Z4 M8 \一般来说，feeder free的培养方法确实比用MEF feeder更容易引起ES分化" l& K8 H, |" n( o( [5 @$ w
你再确定一下你用的培养基的配方，看看其中bFGF的浓度，一般用到50ng/ml，针对你现在的细胞状况，试试调到100ng/ml