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如何纯化慢病毒,需要用超速离心吗 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2016-2-23 15:18 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
看现在慢病毒都只有浓缩的办法,比如PEG,超速离心,或者浓缩柱,超离的话虽然有能提高纯度,但是应该作用有限吧,不知道有没有比较好的像纯化抗体、蛋白一样的方法?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2016-2-23 20:31 |只看该作者
回复 zmfang555 的帖子
3 a: Z$ E# _' E
8 C+ Y: F. E3 D) c- w你可以试试hyclone浓缩试剂盒,离心要求不高
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藤椅
发表于 2016-2-24 14:04 |只看该作者
如果仅仅做实验可以用超速离心,如果用于临床建议过柱子。
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板凳
发表于 2016-3-29 10:37 |只看该作者
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转染后48 和72h 分别两次收集病毒上清,收集后以0.45 μm 滤器过滤,于40 mL 超速离心管中,4℃,72000g/min 离心120 分
  {) ]0 K* T# H- J钟,滴度能够提升50%左右。如果没有超离管,6000g增加离心时间也可以起到增加滴度的作用~
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报纸
发表于 2016-3-29 10:37 |只看该作者
转染后48 和72h 分别两次收集病毒上清,收集后以0.45 μm 滤器过滤,于40 mL 超速离心管中,4℃,72000g/min 离心120 分
/ o4 I2 ?- T* `. C钟,滴度能够提升50%左右。如果没有超离管,6000g增加离心时间也可以起到增加滴度的作用~

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地板
发表于 2016-12-1 08:56 |只看该作者
不建议PEG浓缩,PEG本身会有固体颗粒,离心后也会沉在底部,PEG同时也有让细胞融合的危险。
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