求鉴定养的是不是脂肪干细胞，及解答培养中的问题，急求帮助

苏合香榭

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3 L. j* b" h8 E, ^7 F  Q! g一般脂肪干原代传代后，几天可以长满再次传代呢？

沙漠狐o0

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& p  H, L) C. e5 P, l/ `- a* X- D+ L* o$ U) W6 ]$ V- Z% X3 w8 C
按照传代比例，3-5天

海螺天空

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3 q: e( U2 T) s* _! u' ?
+ u  @1 I) \- W  c和脐带间充质干细胞做法一致么？我想知道你用的什么培养基？

田甜

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2 y0 m! r. |/ Z; u& J5 m6 R$ T亲，组织块贴壁法培养脂肪干细胞，我还没试过。按经验来说，贴壁法比消化法得到的细胞，细胞状态会好很多。我一直以为，脂肪组织因为含有太多的脂肪油滴，很影响组织贴壁和细胞爬出，所以很想了解你培养的细节：组织处理干净后，是否有漂洗？使用的是什么培养基，血清浓度是多少？当然肯定还有其他要注意的细节，如果可以的话，能不能指点指点。, ~# z' W, c% a) a$ s' n
我这边需要大量的脂肪干细胞，希望用较少的脂肪组织得到较多的脂肪干细胞，谢谢。

smile微微笑笑

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8 e8 q9 m$ L. B6 I, e; d2 }9 r/ V我一般收到组织后，就PBS加庆大霉素清洗一下，剔除血迹，然后就剪碎成小块，3mm×3mm左右大小的，然后贴到六孔板中，间隔1-3mm就可以，倒置放在培养箱中，2h左右，拿出来在组织周围加少量培养基，不要把组织冲起来，隔天再添1-2ml培养基，培养2-3d再拿出观察，不要每天都拿出来看，我用的培养基是赛业公司专门培养ASCs的培养基，一套的，500ml培养基，50ml血清，5ml双抗，5ml谷氨酰胺~~~

13153546906

你这是原代得到的细胞吗，原代开始得到的细胞确实不多，单7-10天之后会增殖到传代的数量和密度，一般有保障的无血清培PBS养基都可以应用，残留的PBS是不会对脂肪消化造成影响的，你的细胞看起来确实形态和状态都不佳，继续传代纯化看下，也要控制好接种密度，消化完的脂肪组织上层是成熟的油滴，其次是消化完残留的组织，在下层是洗涤液，最底下是所需的脂肪干细胞种子。

sports123

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请问，您这边有组织贴壁法的详细培养方案吗？在下用消化法获得很少量的细胞，且细胞很杂。非常苦恼，特此向您讨教！谢谢!

zhouyonhzhan

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& {2 E- m9 D  \, R6 K我正在养脂肪间充质干细胞但是做了两次流式检测没有阳性结果！想请教一下您最后纯化的是脂肪间充质干细胞吗？您消化用的胶原酶和胰酶混合的比例是多少和您用的培养基是哪家公司的？我是细胞新手请多指教谢谢了

zhouyonhzhan

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( d' J9 t( @) X3 W2 e7 G* p( ?" d$ \/ ]0 p$ L5 T1 u
求推荐养脂肪间充质干细胞的培养基和公司谢谢

sports123

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# v, F: s, z" p) [. m$ G: Z  w7 N2 L+ H) w8 F6 k
您好，请问有没有更详细一点的实验方案供参考一下。比如，所用的培养基、脂肪小块的大小等等。