求救：冻存后间充质干细胞不贴壁也不是死细胞

chslyx

年前收了一些干细胞，用90%血清+10%DMSO的-80冰箱冻存了一个月，取出后清洗三遍，之后就是细胞就是不贴壁也不死，求救各位大虾

greenhand101

有没有支原体等的污染？培养液的PH是否过碱？

1276916287

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4 k9 X" ^& Z- b9 \4 m( h冻存液没有问题，但是细胞冻存及复苏的时候是否做到了慢冻快融很关键，特别的干细胞，冻存的时候有条件的话可以用程序降温仪，至少得用程序降温盒

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冻存液没有问题，但是细胞冻存及复苏的时候是否做到了慢冻快融很关键，特别的干细胞，冻存的时候有条件的话可以用程序降温仪，至少得用程序降温盒

abcstem

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  k2 h( j6 Z3 x2 {" X' w/ c# ?: T7 }* M
确定培养条件和冻存前一样吗？试剂是否有换过？这种情况我觉得应该是培养液的问题，重新配培养液吧。

saliai2016

不贴壁的话应该是死了吧

biluolinyu

血清和冻存之前的尽量保持一致，另外不贴壁估计细胞也快不行了吧。。。

biovictor

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2 a8 i' v. @/ G2 E楼主，做个PI染色就知道是不是死的了！很简单

chslyx

回复 biovictor 的帖子& O/ K, b! a5 m! a" w! N
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染色后都没有死
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chslyx

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血清和培养基都是一样的