DC细胞的成熟度问题

gengtongyu521

DC细胞培养过程中，本来细胞数量就不多，用TNF-a促成熟以后，还有好多细胞贴壁，DC细胞成熟度不够，查阅资料后，有人用TNF-a,IL-6和PEG-2促成熟？各位大神有什么建议呢？希望多多交流啦。

baby00000003

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- k2 I" J9 P: ~$ D# t1 \倒是听说过有用.....应该是PGE-2吧，prostaglandin E2～
  [7 ]  Y1 n4 m; [- V. q* c检测的什么marker呢？CD14/CD86？

Tracy-Cui

我也是用TNF-a促进成熟，是会有一些细胞贴在壁上的，可以用移液枪轻轻吹打，成熟的DC就会悬浮起来。( `3 {0 t- v9 q; |
, D: _, X( L1 `
你也可以先收集悬浮的细胞，然后用缓冲液轻轻吹打贴壁的细胞，将这部分细胞上流式检测，看看是否有DC。0 I) Z) y3 S; R3 \5 R* f9 r

$ o. A& p8 n" @: _# [希望对你有帮助！

yaolinzhang

回复 gengtongyu521 的帖子
1 y2 J4 N  F' b+ N- ]
+ b" q' h% u  X: i8 u) T- r' ]个人感觉这和TNF-a的浓度及培养时间有关，建议楼主调整一下

994545

我的DC有个别在加了TNF后会明显转化成纤维样细胞，·········求解！！！！！大神      不知是不是前期的因子浓度高了？

拉二胡的拉尔夫

你的培养周期是多少？你GM和白介4浓度是多少？培养基品牌？出现成纤维状是正常情况，添加肿瘤刺激物也会提高DC成熟度
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Tracy-Cui

回复 994545 的帖子& h/ n& c. G; `8 o1 `* n; z
6 b$ E; j5 N2 T  J
1.DC是树突状的，在镜下观察时有些容易被认为是纤维样，准确的还是建议流式检测7 M" @# ~+ D" P" X/ Q* k4 ~* R+ t6 `
2.细胞因子浓度的问题，建议做一下单因素或者正交试验，看看在其他浓度下是否有这种状况。
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5 V& ?% P1 _, Y( L1 i9 p+ a# V希望对你有帮助

我是传奇

DC培养一直都是一个难题，不单是数量上，纯度要求也不易做到，大家所谓的贴壁的或是纤维样的我个人感觉更像是巨噬细胞，在现行大多数培养过程中大家都加入TNF-α促成熟，但是你们有没有想过在这之前要负载抗原呢？个人认为CD40L较TNF-α对存进DC成熟更有效。

momoenn

加入CIK细胞也可以促进它的成熟

六弦七品

我们是用腺病毒把肿瘤抗原基因转载到DC里，让肿瘤抗原在DC里面表达，还有载入一些免疫佐剂，促进DC成熟。这年头，不对细胞进行下基因改造都拿不出手。