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免疫细胞复苏 [复制链接]

刘随新123

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包包
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楼主
发表于 2016-7-15 10:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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人白细胞冻存后怎样复苏，步骤？越详细越好
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奇幻雪蓝

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沙发
发表于 2016-7-15 11:33 |只看该作者
你复苏后要干什么？
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yingfeixiang

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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2016-7-15 15:22 |只看该作者
复苏不都是慢冻速溶吗
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刘随新123

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板凳
发表于 2016-7-15 15:23 |只看该作者
复苏后培养啊，需要离心力和离心时间，想找一个参考，谢谢！
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sryanhong

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报纸
发表于 2016-7-15 17:06 |只看该作者
37度水浴融化至米粒大小，将冻存细胞转移到事先准备好的装有培养基的离心管中。（在吸取细胞时多做要缓慢，因为此时的细胞最脆弱）然后1200rpm，5min离心，弃掉上清，用新鲜培养基重悬后接种即可。
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刘随新123

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地板
发表于 2016-7-15 17:17 |只看该作者
回复 sryanhong 的帖子
. z9 N. y1 W& r0 A' o) W7 N8 e+ i( C! `. u5 K: t
哦，1200rpm转速会不会大了点?你们的培养基是什么牌子的，放血清吗？
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sryanhong

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7楼
发表于 2016-7-15 17:41 |只看该作者
回复 刘随新123 的帖子. @/ C, A( h" q
6 H) `3 l3 Q1 Z0 p  O( T
如果觉着转速大可以降到800rpm。培养基是T551，加5%血清足够了。后期如果细胞状态好的话，完全可以不加血清
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生物太次郎87

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8楼
发表于 2016-7-18 08:27 |只看该作者
若是临床试验静脉回输用，可以将冻存管中的细胞转移至50ml离心管中，生理盐水定容至50ml，900rpm，10min，收集装袋（装袋前取样测活率）。若是再培养就如sryanhong所说，离心参数为900rpm，10min即可。若有疑问，欢迎交流，哈哈。
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刘随新123

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9楼
发表于 2016-7-18 08:54 |只看该作者
嗯嗯，准备做了，谢谢大家的意见，
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刘随新123

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10楼
发表于 2016-7-18 08:54 |只看该作者
嗯嗯，准备做了，谢谢大家的意见，
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