细胞胰酶消化完了之后有大片絮状物是怎么回事？

LVXUEYAN1101

养的贴壁细胞，0.25%的胰酶消化后有大片絮状物出现，怎么吹打都散不开，最后只能用100微米的滤膜滤掉，有哪位前辈能给解释一下是什么东西。

gondobar

很可能是死细胞，你台盼蓝染色试试。

LVXUEYAN1101

回复 gondobar 的帖子: {( d8 y7 b/ S

) @/ e" a. K/ {- }, b( e1 G( E如果是死细胞，是什么造成这种情况？

细胞之家

1.细胞汇合率过高，细胞重叠，老化，消化后，细胞成块掉下，形成絮状物。# W5 n4 v# W9 h  \( {
2，如果是成纤维细胞，有可能是细胞分泌的胶原蛋白能力旺盛，絮状物是，胶原蛋白连接的许多细胞。
  m+ }" ^  u0 o% c2 G3，消化过度，大量细胞死亡，释放出的DNA缠绕细胞，形成絮状物。

sfnana

个人认为之所以会出现这种状况可能是由以下几种原因造成的：
+ ~. u! L  M8 N' B1.过度消化后死细胞释放出来的胶质状的DNA缠绕了细胞碎片形成的，这种很难吹散开。0 [' l* [1 Z' U* _' V
2.有可能是细胞间质粘在一起使细胞成团，这样会造成细胞状态下降，细胞就不容易贴壁。
8 Y0 |- U8 B) }; ~0 p5 O: ?3.离心时的速度适当降低一点，防止细胞离心时结团过于紧密，不容易吹散。

免疫与细胞

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& H% I' ^" X. h# V6 K如果你感觉消化效果不好，可以调整胰酶种类和浓度，胰酶类型有很多，需要谨慎点选择，对比看看。此外，消化时间可以适当延长，消化时要轻轻摇晃。

风倾颜

1.可能是细胞间质粘连在一起，细胞成团造成的
: z  {& t6 Q/ U( q) S, l2.可能是细胞老化，状态不好，消化后，细胞成团掉下形成的絮状物。/ {7 `/ v6 L+ \4 c
3，消化过度，细胞死亡后释放出DNA缠绕住细胞碎片形成絮状物。; Z" e4 Y( P9 P  O
建议：消化时间不宜过长，消化过度易造成细胞状态不好，细胞传代次数过多，容易老化，可以冻存之后在复苏试试，此外细胞离心时转速不宜过高，因为离心转速过快，细胞不易吹散，易造成损伤。

jiangmeng

消化时间不要太长，或者换用更低浓度的胰酶消化细胞。

jxsese

我之前遇到过这种情况，建议消化的时候可以这样操作：加进胰酶之后摇晃一下，使胰酶在细胞上面过一遍，这时你很可能看到有些细胞成片脱落，也就是你看到的絮状物，这个时候可以快速的将这些块状物倾倒到瓶口，随胰酶一起倒掉，可以再向瓶里加入新的胰酶也可以不加，让剩下的胰酶继续消化细胞，这样坚持传代几次看看会不会好转？我分析主要原因是细胞生长状况不均匀，或者细胞活率相差比较大，有些细胞比较活跃有些则比较萎靡，生长不好或者说铁壁疏松的细胞会很快就消化下来，而状态好的细胞则消化时间会比较长。

天龙八部

是不是消化时间太长造成细胞死亡了？消化前看看细胞状态怎么样？