崩溃，茜素红染色又没有染出来

城墨

: q. C( ^; F1 ]& G2 {6 Y! w* B
( [9 F. M2 |0 T8 e' l第三次染色了，每次成骨诱导都是大半个月时间
- r* p$ ~$ H6 J; z9 b$ }# ?今天是第三次染色，依旧什么都没有. e/ o  ~0 H3 N* h* r4 O9 w
我的做法是，MC3T3-E1细胞，在VC和甘油磷酸盐的成骨诱导下14天。
/ D6 y+ W. ^& ^& `. h做AR染色，先PBS洗细胞，再95%乙醇固定10min，再蒸馏水洗三遍，最后茜素红溶液染色。3 _( b6 C. V) ?: Q
问题是茜素红我已经用过很多种了，买来的，索莱宝0.2%的，没染出来；自己配的，sigma粉末，0.1%，PH 8.3，用Tris配的，还是没有；1%，直接用蒸馏水溶解的，依旧很淡。3 d* m) C/ w: m! k/ K7 U9 ^* h
感觉镜下能看到钙结节啊，是不是那种致密透亮的？+ m! M0 i- Z- |: M, Y; k( v
不知道哪里出了问题啊，我还打算染MSC呢，这个染色一直做不出来，真是让我太烦恼了。

蛋蛋心月

传个图啊

yinchong42

用的什么牌子的血清？会不会是时间不够，我去年做的时候，做了17天没有结节，做了26天就结节很多了，，，

是你啊

, i7 @3 @3 }/ N! m
8 @# I( C, f! G6 v5 }) w$ D5 ?
我也染不出来，求指教。实验太虐心

细胞海洋

回复 是你啊 的帖子
% [! H) H/ j7 m) {1 Q5 N  c1 p' x% e9 L+ x' |; x& G6 w
建议你发新帖提问