一个最基本的细胞解冻操作方法？

gxbzjznn

大家解冻细胞的方法？如图所示，欢迎讨论，说一说两种方法的优缺点，你们更倾向于哪一种？

cxs

这个两种经常交替着来，看心情，想到哪个用哪个吧，没什么刻意选择哪种。考虑的问题有以下几种7 L6 u) s3 N, D
1、需不需要计数& F/ S( t8 Q  W4 ?% D3 o' s
2、细胞接种数量需不需要很精准（大量稀释的误差肯定比小量小）
; C; A" T1 g  ?  B2 Q3、另外，接种量多少（比如你上面那个，12ml如果是在15ml离心管，你可以试试，用枪真不是很好吹匀，如果是在50ml，是否浪费了点）
6 e% Y; y6 U* Q  `8 \& o0 I8 [3 |/ c4、在区别不大的情况下，哪个快用哪个5 E  ?8 E! U( q  F5 L- m  `
5、如果刚好像你上面那个情况，我习惯用6ml稀释，吹匀均分，每个孔再补加1ml培养基，原因无他，主要是懒，这样子可以不用调枪啊，哈哈哈

gxbzjznn

回复 cxs 的帖子8 M" Y4 }. r$ z0 R3 d& x( X& J

/ Z6 p5 B5 V% ~你们不用电动枪？不用10ml甚至25ml的移液管？我个人觉得如果对细胞数要求不高，肯定上面那种好，而且我更倾向于预先在well里加一些medium。即便是对细胞数要求高，我也觉得需要这样做！

cxs

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& _% }: h' k7 z  |: c! x) k
, z1 X1 z  t! v( j电动枪，就这么点确实用不上，也用过一次性移液管，还用过巴氏管。不过目前我们是科研，不是针对临床，能用枪基本都用枪，省一点也方便一点。

gxbzjznn

回复 cxs 的帖子/ T! g7 B$ T' ~9 C

8 o. A1 Y' X. G( u$ `电动枪也可以插大量程的移液管（相当于枪头）啊

cxs

回复 gxbzjznn 的帖子$ x) U8 h$ B+ f3 W

* _$ Q$ E% K6 ]: J; U# x我的意思是不至于为了重悬那么一点细胞去浪费一个移液管，就价格来说移液管>枪头吧，所以我选择枪，纯粹是从价格上来考虑，并不是说孰优孰劣。

fm001982

接种细胞少，建议先全部分散细胞再加入培养板。9 P5 r1 l  {. g. i- O
一方面，建议多清洗一次，一方面，注意吹打均匀。

sfnana

2种都可以啊，个人习惯先在培养瓶或者6孔板中加入部分培养液，然后再加入重悬的细胞。然后十字型晃动培养瓶或者培养板，混合均匀。当然这个要看你是否需要计数 ，如果要计数，就在离心管混匀之后再加到瓶或者板子里。
: X1 K3 V. Z. g1 H% q" I9 u4 q% n6 r1 e

gxbzjznn

我觉得可以设计、做个小实验Test一下两种方法的优劣

UlissesJR

我服了