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余生请多指教

新手上路

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楼主

发表于 2017-3-23 10:22 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

图里这些黑的是什么啊，提的原代就有！！！，提取为简单的取骨，培养基冲，然后24h换液，以后2天一次，体系为10%fbs+双抗+培养基
还有消化的问题，0.25胰酶预热，pbs洗一遍，然后加入1ml胰酶消化，显微镜下5分钟为何还没有消化下来
msc折腾了好久了，，导师天天都在催T-T，求战友帮忙分析哈

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laputa

新手上路

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沙发

发表于 2017-3-23 14:20 |只看该作者

黑胶虫污染了吧

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cuijiaoyan

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藤椅

发表于 2017-3-24 09:34 |只看该作者

建议FBS换进口的，这种现象就没有了

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liuyunmeng2002

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板凳

发表于 2017-3-24 13:09 |只看该作者

像是污染了

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xufeng8686

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报纸

发表于 2017-3-24 16:54 |只看该作者

换血清试试

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金鹏

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地板

发表于 2017-3-24 17:45 |只看该作者

看你这图更像是焦距不对，一般即便是黑点也没有这么黑。你先确定一下是不是瓶子内部的，如果是内部的你使用血清前离心一下，可能是血清里的。不像是微生物污染之类的。消化不下来的话建议你换一下你的消化液，正常情况下5分钟的消化算是就一点的了，如果消化不下来可能是消化液的问题。

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flylover1221

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7楼

发表于 2017-3-27 14:22 |只看该作者

首先，楼主照片不太清晰，焦距太近了，曝光太强了，根部看不清楚；0 f$ f- k; v( G6 e5 F
其次，原代培养骨髓间充质，出现底部黑色的小点，如果在高倍镜下会动，可能是黑胶虫污染，考虑更换血清；如果不动，但能随着培养基的晃动飘动，应该是附着的死去的血细胞，尽量换液彻底，PBS清洗后再补加培养基。