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红细胞较多会不会导致脐带干细胞无法爬出 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-4-20 13:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
培养一周,培养瓶内有一些红细胞,由于半换液,所以红细胞仍然存在,第7天没观察到细胞爬出,查文献说红细胞微环境PH较高,请问红细胞较多是不是对脐带干细胞爬出有影响?
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沙发
发表于 2017-4-20 15:47 |只看该作者
首先,红细胞较多会不会影响细胞爬出?答:会,不仅会影响细胞爬出的时间,还会影响细胞生长。原因可能是PH值、微环境等,更有可能是红细胞破碎后释放的铁元素造成的。其次,红细胞需不需要彻底去除?答:没必要,脐带处理过程已经去除了大部分的红细胞,这个步骤需要多次练习,剩余的没法用基础方法去除的,有人会选择用红细胞裂解液来去除,其实没有必要,红细胞影响了细胞爬出的速度,但是大量红细胞才存在的情况,一般来说,细胞一旦爬出形成克隆后,不会太会受红细胞影响,换液传代后基本就不存在红细胞了。最后你现在应该怎么办?答:等,脐带细胞爬出可能3天可能5天,可能20天,7天还不太能说明问题,然后排除其他原因,比如组织块有没有漂浮等
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藤椅
发表于 2017-4-20 16:06 |只看该作者
处理的时候还是要尽量去除大部分的红细胞,抽去动脉、静脉,对组织块多次洗涤...
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板凳
发表于 2017-4-20 16:44 |只看该作者
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第一次换液可以选择全换液,能把红细胞去除干净一些  红细胞对于脐带间充质干细胞爬出是有一定影响的 ,但是只是延长细胞爬出的时间 一般时间稍微久一点都是可以长出来的
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报纸
发表于 2017-4-20 17:39 |只看该作者
肯定会有影响的
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金话筒 优秀会员 小小研究员

地板
发表于 2017-4-21 09:13 |只看该作者
红细胞过多   细胞培养的PH会受到影响  长出的原代细胞形态会有一点影响  不过一段时间后会死亡破碎    培养瓶中会悬浮大量的黑色小颗粒    就像污染的样子(黑胶虫)  传代后要经过一次换液才能出去     红细胞过多  说明你在剥离静、动脉的时候你没有剔除干净    很可能有一些内皮细胞等的杂细胞在里面    流失的时候阴性表达容易检测不过   
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发表于 2017-4-21 12:40 |只看该作者
规模化培养间充质,采取的酶消化法,红细胞洗的过于干净,细胞生长状态反而不太好。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2017-4-25 23:01 |只看该作者
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) f7 x1 ]+ e9 O+ f* c6 o% n
2 P$ D8 |! W+ b1 N/ {能否分享一下酶消化方法?
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