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请问分离培养小鼠脂肪干细胞用的什么培养基? [复制链接]

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楼主
发表于 2017-5-8 20:07 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
实验室有师姐养的大鼠ADSCs,用的是:DMEM-HG,12.5% FBS,10 ng/mL bFGF,双抗(青霉素100 U/mL,链霉素100 U/mL。分离好几次了,细胞老化非常快,我查阅文献有人用的低糖DMEM,大家有什么好的建议吗?急求。
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沙发
发表于 2017-5-8 20:25 |只看该作者

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藤椅
发表于 2017-5-8 20:25 |只看该作者

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板凳
发表于 2017-5-9 09:19 |只看该作者
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回复 城墨 的帖子7 X& R" f. g4 F. F5 E: Y7 q
4 b% E' V9 s/ B
这个图也太不清楚了点吧,一般干细胞都不适合用高糖培养基。低糖的M199,DMEM,1640,DMEM/F12都养过,都能长出来。干细胞培养所用完全培养基养分不能太高,高了就容易分化。12%的血清已经很高了。有条件的话可以买干细胞专用的培养基试试,不过太贵,本人没用,不知道到底好用不好用
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报纸
发表于 2017-5-9 15:14 |只看该作者
回复 fenglinzhu 的帖子5 C! q( T7 m( j  }
' B  _. O! M# W7 B$ T8 F5 m
谢谢,查了一些文献用DMEM/F12的占多数,打算换DMEM/F12养,把血清降到10%。以前一个师姐用高糖养的大鼠脂肪干细胞,好像还可以。
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地板
发表于 2017-5-9 17:00 |只看该作者
回复 城墨 的帖子
- T7 K& R  n7 W. K. `- g/ Z6 B6 ]% k, P, ]
其实要说的话我感觉M199的效果会更好一点。血清的话甚至5%都够了。
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发表于 2017-5-10 08:50 |只看该作者
回复 fenglinzhu 的帖子
& Z4 b, q3 i5 W3 X
1 _& b* J9 j5 X6 F谢谢,我还有一个你问,我查了一下Gibco的DMEM/F12,发现它也是含高糖的,会不会也会影响?
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发表于 2017-5-10 09:05 |只看该作者
回复 城墨 的帖子
6 ~" P0 Z" ]* N+ Y' F9 E6 w, `/ p+ b- T1 l
你买低糖的啊,DMEM/F12不是高糖啊,你看错了吧
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发表于 2017-5-10 10:00 |只看该作者
回复 fenglinzhu 的帖子- h1 |, _- ]! v

: W- \% L6 x  o! ?; m$ d查了一下,Gibco DMEM/F12只有高糖的。好多文献上面只说使用DMEM+10%FBS培养,这里DMEM是默认低糖吗?
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发表于 2017-5-10 11:07 |只看该作者
回复 城墨 的帖子% H5 O; Y% K/ L! j3 ?- x1 q

, b! U# s' N  ]好像DMEM/F12是没有高糖低糖的说法的,含糖量不算高的。DMEM的话最好用低糖吧,高糖可以养,但传几代就分化了。
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