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间充质干细胞诱导成软骨用番红O染色的图拍片 [复制链接]

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楼主
发表于 2017-6-12 14:41 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
用gibco的诱导分化培养基诱导间充质干细胞分化成软骨细胞,诱导21天后,用番红O染色,所有的细胞都染成鲜红色。说明书上推荐使用番红O染色检测,但是番红O可以染色所有的细胞核,又可以用于鉴定软骨细胞,请问其原理是什么?
- x, x; b. X/ [% e; V! ?0 O图中所染色的红色细胞核能说明成骨诱导成软骨细胞吗?

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沙发
发表于 2017-6-12 14:42 |只看该作者

染色图片

本帖最后由 honey棉花 于 2017-6-12 14:57 编辑
8 p/ l) E$ k, W2 l
" ?7 `: R/ m! `  放大100倍的图片
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藤椅
发表于 2017-6-12 14:47 |只看该作者

染色图片

本帖最后由 honey棉花 于 2017-6-12 14:55 编辑
* n( Q( P$ C/ B& X$ p! b
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

板凳
发表于 2017-6-12 15:08 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
成软骨不是要用U底96孔板离心成致密的小细胞球再诱导么?% O* q: ]" B4 ?# K9 R& b5 R/ W
而且印象里是要用toluidin blue染色.....

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报纸
发表于 2017-6-12 15:34 |只看该作者
这张照片说明不了什么的。首先,软骨诱导实验不是要球状培养吗?其次,即便你是平板培养诱导,拍照的相差显微镜也不对,要看清细胞才能说明问题。而且,能不能说明是软骨细胞的key marker 是Collagen II,safarin O只是胞外基质染料,一般的成纤维细胞的胞外基质都能吸附一点染料,所以说明不了问题。希望对你有用

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地板
发表于 2017-6-12 17:22 |只看该作者
能否告知下hMSC细胞分选流程?

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发表于 2017-6-12 23:57 |只看该作者
回复 luoziwei 的帖子
; n4 w* a; p+ x/ y' p2 C( N
% H' b/ M6 o6 c8 o6 U  x& B+ O能有相关的知识分享吗?谢谢!

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发表于 2017-6-13 10:33 |只看该作者
回复 小飞雪2300 的帖子
* F+ A% c. d# y/ V9 {4 n
6 X  w1 v; w2 ]  Q本文上半部分说到MSC体外诱导软骨分化的protocol# S+ [4 [* [7 K* j% F% E
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发表于 2017-6-23 08:44 |只看该作者
回复 luoziwei 的帖子
" T$ y& p2 L% e& {
/ p9 G/ F$ h# k8 ]6 q+ t) x做了平面培养和微团培养,但是为图案培养细胞密度大很容易造成细胞脱离培养板的情况,诱导第4天微团就脱离了,根本检测不到# O8 v  \$ h0 @9 ?8 }; l: l8 B
番红O燃料是说明书推荐使用的,做空白对照液发现了所有细胞都能染色

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发表于 2017-6-23 08:56 |只看该作者
回复 honey棉花 的帖子
% `0 v0 Y7 b% ?) ?) A% E
- n" A& a1 L! _细胞团找不到就有可能在换培养液被冲掉了。番红O染色不能作为MSC软骨分化的key marker,关键还是collagen II。成纤维细胞的胞外基质也能吸附番红O染料
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