大家来谈谈CIK细胞

luoye1986

回复 haiq1984 的帖子8 p& X0 `7 N1 g% o

  N( k0 X: }3 R$ F5 z我们是刚开始做，再说对于肿瘤疾病的疗效很不好定义标准，就像晚期的，能够延长生命几个月的就已经算很不错的了，对于早期的，根治几乎不可能，只可能减缓癌变的速度吧，这只是我个人看法，呵呵

haiq1984

回复 luoye1986 的帖子# G7 W5 @' L0 m

; t! }. r, {6 w8 r- j& u/ L现在好像主要用于放化疗后的免疫康复，CIK对于放化疗后残存的肿瘤细胞，延缓肿瘤的复发。单一应用CIK治疗根治肿瘤，应该是不行的，它只能表现为对肿瘤细胞的免疫杀伤，但不能根除吧。
! A5 D0 t9 d0 W6 n9 L$ |5 c' z不过个人感觉这种治疗方法对于提高患者的生存质量还是很有帮助的。! G1 u4 g3 _4 w1 f, t& H* A5 v
个人意见。

luoye1986

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4 E0 ?+ o$ m( [, b- h- S" N( t4 f7 L1 U! W$ A7 L' e' d  F6 h
对，现在不是有CIK-DC共培养和联合治疗嘛，不知道效果怎么样

haiq1984

理论上来说DC-CIK联合应用更加诱人。

joesiezhao

最后一步加入人血浆，这个好像已经淘汰了吧，由于人血清应用于临床有很多严格的条件，现在都用无血清培养基。

kosmos.y

我们实验室也有培养T细胞的，一般按下面这个步骤做，
8 ~; r' T3 I$ p! D( X* O, j3.以一袋血为例，大概20-30ml，以1:1用生理盐水或者PBS稀释血液（要注意用酒精棉球擦拭血袋开口）
4 M* j# `! r! |. \4.将混合的液体沿离心管壁缓慢加入到装15ml的淋巴分离液的50ml离心管的液面上。比例是1：2(淋巴细胞分离液主要成分是葡聚糖与泛影酸葡甲胺，主要用于（1X107/ml浓度的细胞）; O5 V8 |$ u2 q+ T
5.室温1600rpm 20min  升速为7，降速为2。离心后第一层为或者组织匀浆液层。第二层为环状乳白色淋巴细胞或单核细胞层。第三层为透明分离层。第四层为红细胞层。（红细胞层表明悬起的部分白细胞可以加入几ml，pbs反复离心洗将这部分白细胞也收集）
7 z6 W0 C& _6 d6.吸取上层白膜，尽量避免吸取红细胞。
1 X- Y: H, D, g7.上清液用生理盐水或者PBS补满，1800rpm  8min: O/ D& u" P5 @0 x
8.弃上清，沉淀即为PBMC
1 J) d/ X( z/ U+ v+ D" C3 }2 [- w9.生理盐水或者PBS  1300rpm 10min 再洗一次
& B9 N* g9 Q3 o+ h$ {8 D) T10.用1640培养液  10%四季 胎牛血清培养  贴壁过夜或者45min% l- \! o! l$ \
11.贴壁是让DC等细胞贴壁培养，然后我们取悬浮液，悬浮液即为淋巴细胞。' w: y9 z- h; J  \/ t7 I7 c8 J
12.然后就加各种细胞因子，获得想要的各种T细胞。因为剩下的细胞主要以CD4+和CD8+为主