跪求脐带间充质干细胞的鉴定方法-免疫荧光技术

SKC-SFC

最近在做染色体异常核型的脐带间充质干细胞的课题，需要做免疫荧光检测方法。看了国内外的一些。都写得相对简单。寻求详细的操作方法。万分感谢！

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急用

缥飘实验员

这个细胞各大文献几乎没有人染，UC-MSC 有特异性的 marker 么，可以染 CD 分子啊

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/ H! J/ o( f% u# Z$ Z( {我检测的是CD105，CD73，CD34，CD45 就是缺少详细的操作方法，包括一抗和二抗的选择。

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哎，帖子就这么沉了啊

baby00000003

要做核型分析吧？找第三方出报告～

SKC-SFC

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' h& E; B# z! ?2 N6 n- D* g6 L- S' K3 U5 \/ f  _. t- a
不是做核型分析是做间充质干细胞的表型检测，用免疫荧光的方法检测

baby00000003

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' N/ W8 Q" n! l5 n9 D" X6 S) W5 ]5 w) b
做表型的话，流式多好～操作比IF简单，而且更有统计学意义

bin

脐带间充质干细胞一般不做免疫荧光染色，一般做流式检测。阳性CD分子有CD90，CD105，CD73.阴性CD分子有CD45，CD31等。不过你要做免疫荧光染色也可以的，一抗选小鼠或者兔抗你要的CD分子的抗体，二抗选择荧光素（一般是红色和绿色荧光）标记的羊抗鼠和羊抗兔的抗体。具体操作应该有很多方法的，这是非常常用的技术，你们实验室肯定有人会。关键是抗体不要相互干扰。另外再用Hochest（蓝色荧光）染细胞核，这样三标的照片很漂亮的。

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  Y) J% M  D! B# f
. \  r8 _0 Z1 |" P4 x7 ^谢谢您。我们流式做CD105,CD73，CD90，HLA-DR,CD34，CD45，CD44，CD29，CD11b,CD19.免疫荧光更多的是做膜内表达的CD分子。或者分化成神经干细胞等细胞的一个鉴定方面。