跪求脐带间充质干细胞的鉴定方法-免疫荧光技术

SKC-SFC

最近在做染色体异常核型的脐带间充质干细胞的课题，需要做免疫荧光检测方法。看了国内外的一些。都写得相对简单。寻求详细的操作方法。万分感谢！

SKC-SFC

急用

缥飘实验员

这个细胞各大文献几乎没有人染，UC-MSC 有特异性的 marker 么，可以染 CD 分子啊

SKC-SFC

回复 缥飘实验员 的帖子% a8 G+ M  r7 H% I2 B
  M% f) Q6 W# S. Z& `& }1 H8 U) b- F
我检测的是CD105，CD73，CD34，CD45 就是缺少详细的操作方法，包括一抗和二抗的选择。

SKC-SFC

哎，帖子就这么沉了啊

baby00000003

要做核型分析吧？找第三方出报告～

SKC-SFC

回复 baby00000003 的帖子
0 a! R4 q4 h, b. d# K, j+ I, K5 @% ]/ `& G
不是做核型分析是做间充质干细胞的表型检测，用免疫荧光的方法检测

baby00000003

回复 SKC-SFC 的帖子6 ~4 p7 i$ C" L# D
! w" V9 _0 r; Q( g# U7 e" h
做表型的话，流式多好～操作比IF简单，而且更有统计学意义

bin

脐带间充质干细胞一般不做免疫荧光染色，一般做流式检测。阳性CD分子有CD90，CD105，CD73.阴性CD分子有CD45，CD31等。不过你要做免疫荧光染色也可以的，一抗选小鼠或者兔抗你要的CD分子的抗体，二抗选择荧光素（一般是红色和绿色荧光）标记的羊抗鼠和羊抗兔的抗体。具体操作应该有很多方法的，这是非常常用的技术，你们实验室肯定有人会。关键是抗体不要相互干扰。另外再用Hochest（蓝色荧光）染细胞核，这样三标的照片很漂亮的。

SKC-SFC

回复 bin 的帖子
& k& @6 c8 S0 h3 L  }, p3 J/ U0 n, D* w. P* T$ t+ e, W. s- w) r
谢谢您。我们流式做CD105,CD73，CD90，HLA-DR,CD34，CD45，CD44，CD29，CD11b,CD19.免疫荧光更多的是做膜内表达的CD分子。或者分化成神经干细胞等细胞的一个鉴定方面。