大家有做细胞爬片的吗

xxzhang83

我用1%明胶，用来贴内皮细胞。/ G' r! q9 p" ]( i. Z. V! A
每种细胞用的包被都不尽相同，你要查一下你爬的细胞用什么包被最好。

iash

很多人都是用多聚赖氨酸，我是贴壁细胞，直接将盖玻片放到六孔板，细胞悬液加到盖玻片上，加培养液过夜，第二天就可以了，也不太脱片

wang_kai1212123

根据你的细胞种类 就可以了 ，如果是贴壁细胞 不必处理，直接放在载玻片上 然后将载玻片放到6孔板里培养，前提是 现在载玻片上 滴上几滴，待4个小时后 贴壁细胞贴上去之后，在加入适量的培养液。培养几天后 当载玻片上细胞覆盖率达到70%左右 即可做荧光染色了。如果是悬浮细胞，首先要离心，然后加培养液，细胞适量后，可以直接放到载玻片上，做免疫荧光。个人拙见，请大家指教~~~~~

火云豹

好 可以学习了

mq402716390

1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，( X4 i1 |4 ^  @
3 T: I2 f% j! {; ^, D& x          2.细胞得沉降到附着物体表面* R, [7 F8 G: y, V0 Y5 j- i( b( @  p! a* C4 x3 z
          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

luckykiki

受益

xbs530515

贴壁细胞一般还是没有问题的，你具体是做的什么细胞，我做过小鼠巨噬细胞，直接在12孔板里放灭菌后的小玻片，细胞贴附的很好，之后就进行免疫组化和其他的染色，挺方便的。如果你的细胞的确不好贴，可以试试 多聚赖氨酸处理爬片，这个用的也多。

wenwen629

赞成8楼的说法

wryyx

多聚赖氨酸好，我做过

sunnyhuimin

- b5 t$ O3 c7 r( l) Q) e7 b' ?. @4 T; X" B2 h6 n, }2 V2 m) ~: a/ X
你的细胞是什么，如果是间充质干细胞，我前段时间做间充质干细胞免疫组化就是细胞爬片，一些经验可以交流下：
& ]: z: V( K. \1针对免疫组化，我查的资料说如果用多聚赖氨酸包被会影响组化结果，会出现假阳性结果，所以我认为没有必要用，只要保证玻片干净无菌细胞爬片是没问题。
* |2 R, q. q2 o3 S2 如果想细胞爬片好，要保证你的细胞状态是很好的，也就是贴壁性及生长状态好。  q8 L! ^3 P- m* @2 J' ]# r
3玻片清洗、浸酸过夜、再次清洗、高压灭菌都要保证质量，而且在种细胞时玻片最好能和使用的小皿孔径一致，玻片贴于皿底且加medium后不漂起。
" d. u  F$ [5 b7 o. V: u' t4在免疫组化的过程中清洗时力度不要太大，PBS没过玻片后，轻轻晃下就可以了，时间到后，用枪头靠近皿壁吸掉PBS洗液就可以了，这样就可以防止脱片。( c; ^. \( b3 y/ A/ v% R, M
5细胞爬片时间建议为48h,可以保证爬片数量和质量。8 m/ |2 O$ m/ i  m" ]+ r' ]
    希望对你有帮助