大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗" O) k( c4 U% r; m8 |# _6 a' c

, l+ ~) x& f( l8 M) Y/ `   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液8 C( D! t7 p+ p4 z" S
也有人说
) g( Z' N$ i8 {+ ]0 u* o* @) }   爬片之前用0.1％明胶涂玻片% m0 b5 k9 C3 n' [' E+ c. r; i0 U7 O3 e

3 P# h8 D# g, f) Y; K" e0 Q/ J大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，( M: B, Q& s! l" W$ X0 }
          2.细胞得沉降到附着物体表面
% [3 H1 {$ Y) J. p          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。* c) f1 R/ z, ~1 V4 X+ k6 C
另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

# X5 Y7 m$ _  B; n3 G  t+ {
$ H' t& Y7 f1 D3 e7 ~  {& p如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。( }0 z6 ~* }8 w$ }

; B$ e4 F3 e0 g& r% A   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。
9 \3 I2 Z' X$ D# l' O   1 ^4 k: ^- ~& A8 D4 v4 l
   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；1 r6 n( J  y+ N- T! V" B
层粘蛋白，这个没用过；
/ f: n( P  i$ h% B胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。" _1 O8 P- s2 @' T; t. Z
个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行; O0 J% `6 ?' e: O7 l
我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，1 I  D3 Q' B. R5 L5 M
如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，& T$ K/ `: ~+ J% j
这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。