大家有做细胞爬片的吗

火云豹

我做细胞爬片 想用 多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液 增加细胞的粘附能力 但不知道哪个的效果更好 有人有做过的吗
+ i# P" y6 H4 D( j. K9 E& M. X) K( P0 M: }! v( o' Q
   多聚赖氨酸或者层粘蛋白或者胶原溶液8 j4 X- X: h9 @' v1 q0 K, l
也有人说 ' M# q$ B) M( p) ?. W1 Z
   爬片之前用0.1％明胶涂玻片- K' m2 F- o3 g0 ^$ y# S3 e
( u8 A) x; Q0 b+ [' r  k
大家讨论一下

suhsia

看看嘛

foxp3

关键是你是什么细胞！不同的细胞对于你说的那几种粘附介质效果不一！所以如果你有条件，可以几种都试试，如果没条件，选择多聚赖氨酸就不错，这个用的比较多！

火云豹

好 大家可以学习了

ziyunfei1982

关键在爬，1.细胞种类很重要，不贴壁的细胞就很难了，
2 g" C0 e, d4 u8 \          2.细胞得沉降到附着物体表面
- M1 [' |) P& w$ X          3.附着物体表面可以让细胞有极性，分泌一些细胞外基质或者膜表面锚定蛋白

kuangxiaocong

不如拿细胞团块来切片

oliviawy

我是用得硅化的玻片，不需要自己再处理，效果挺好的。' X: M6 E7 W, @( \. m( k
另外，你还可以做细胞蜡块，蛋白定位更准确一些。

prettybear

( D- d: r- \- e, N
, ]" X* F" ~7 y+ W
如果是贴壁生长的肿瘤细胞直接爬片即可。
0 g+ ?7 ]* q( F  v# K; Y8 u
' w1 g/ v( j( j6 D8 {   将盖玻片用蒸馏水轻轻洗去浮灰（进口的不用，国产的较脏），放入80-100%的酒精中，用镊子取一块在酒精灯上燃烧（易碎，做熟了就好了）后，放入6孔板中。冷却后将细胞种上即可（一般需要长过夜以上）。长好后用多聚甲醛固定后做免疫组化。
. o# Y0 V- x, L  F   
$ R7 ~& M$ f" _   不太脱片。

小鲁鲁

多聚赖氨酸，这个在爬片中比较常用，可以根据需要调节浓度；& }5 A/ C. c2 X8 S* `
层粘蛋白，这个没用过；
. ?) e; o9 h) W2 x胶原的种类很多，常用的有鼠尾胶原和人胎盘胶原，而且在transwell中用的比较多。
3 R: ^" B* t, I个人的感觉是这类增加贴壁的试剂的使用与否要和细胞的种类相关，比如上皮细胞，一般贴壁就比较紧，不太需要。国产的盖玻片的话，质量很不好，现在有处理好的现成品出售。经济上允许的话，建议买成品的使用。

yac508

根据你的细胞来选择的，你用的细胞种类不同就不行
9 H/ Q0 x# }' F$ K" `4 t5 G+ S我以前用过一些细胞（非干细胞）不用处理玻片就可以粘附上，
' E- P1 a$ b- l, f0 @如果你觉得需要处理的话，我建议还是多聚赖氨酸，) t: _0 b! e' S( I4 @, @2 I
这样处理的方式是abcam抗体公司提供的实验方案提到的。