PGC的培养 补充中

ellapan

欢迎加入讨论,如果你做PGC的培养,请注意她的时间段,小鼠是胚胎期E13.5以前称PGC,人胚胎期E5-9week称PGC,此后停留在G1/G0的Mitosis arrest期,直到出生后才开始恢复有丝分裂' |- y# L0 R  @. D+ d0 U

2 a$ Z$ H* D8 @* w9 U$ Q  @如果你刚接触,我推荐你看看下面的文章
, \* V' o% h- [* X/ W, s1992 long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture9 T# E  z8 F9 ]5 f- P( w
1993 Proliferation of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro A Key Role for cAMP/ S  N  Q7 H6 c7 ]$ A  h" _+ f. o
1994 Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth5 |& o* [! Y5 L' w  d( e5 L) C
1995 Purification of Mouse Primordial Germ Cells by MiniMACS Magnetic Separation System3 w4 ]3 O- |' X: u& h- b  a  B
1995 Retinoic Acid Is a Potent Growth Activator of Mouse Primordial Germ Cells in Vitro' {. V0 {4 y& X
1996 Autonomous Regulation of Proliferation and Growth Arrest in Mouse Primordial Germ Cells Studied by Mixed and Clonal Cultures. F: `. a" V+ a5 E, U8 d: ~* @1 d, K
1998 In vitro adhesiveness of mouse primordial germ cells to cellular and extracellular matrix component substrata
( Q, h' p6 ~6 N7 T1998 Role of Fibroblast Growth Factors and Their Receptors in Mouse Primordial Germ Cell Growth% h* v. l% h, S3 q% N1 L5 `
2000 A Role for E-cadherin in Mouse Primordial Germ Cell Development
' P/ }' v& O0 p/ x$ E, R& L2000 Regulation of primordial germ cell development in the mouse
; o9 ?& h$ a. ^( M; \' c  u2001 The allocation and differentiation of mouse primordial germ cells
3 u5 W! Z5 |) ]0 w2001 Twenty years of research on primordial germ cells
4 U& m$ |+ F; u( g& U# y2003 Developmental fate of embryonic germ cells (EGCs), in vivo and in vitro
. U& d* H: n9 `. \/ a  L8 |2003 Primordial germ cells in the mouse
! G- w2 a8 h# V5 R+ n! {2003 Purification of mouse primordial germ cells by Nycodenz, Q9 v4 H* `/ x
2004 Autocrine and Paracrine Mechanisms Regulating Primordial Germ Cell Proliferation& W; y5 o  _3 C+ U% F# s
2004 BMP signaling mediated by ALK2 in the visceral endoderm is necessary for the generation of primordial germ cells in the mouse embryo$ x/ ?* A8 }1 [. J) \5 s0 P
2004 Experimental approaches to the study of primordial germ cell lineage and proliferation# {8 K* P) ~. F
2004 Oct4 is required for primordial germ cell survival$ R. O" i' i  c1 ~
2004 Regulatory role of BMP2 and BMP7 in spermatogonia and Sertoli cell proliferation in the immature mouse.- `0 o1 v2 Z& }' M* P
2005 Growth factors sustain primordial germ cell survival, proliferation and entering into meiosis in the absence of somatic cells
$ Z& D( t- y& U8 O1 R# V% T5 ~
$ G; }2 Z& X( h) W& Y& s1 Y上面全部是小鼠的PGC分离,培养,鉴定和信号调节的文章,不全,但比较有用.你可以挑你感兴趣的看

jiejesse

很好

ppcl2

% m/ R  R( {# v' N2 `& f. [; p2 v! v
国内现在谁做老鼠或人的PGC比较牛？谢谢！+ s* R. `; B* N, z& l1 x3 S0 C
现在光养一养，已经不行了吧，分子调控，表观调控才是王道。

ellapan

回复 3# ppcl2
$ e: H" t6 L' x8 F, Q8 p- x- Q- p3 a+ e4 E! w8 l
   呵呵 我就是做小鼠PGC的，过去的一年一直做表观遗传之类的，现在实验基本开始收尾，目前开始作ES向PGC分化方面的 具体思路还没形成 希望你多多指导; p& D3 R0 D" u- B
  补充一下 目前国内作PGC比较牛的人有动物所的几个大牛 像孙青原等人，还有科大的史清华和孙斐等人 国内的还有沈伟等人% V; J3 j+ @# Z
你说的表观遗传其实我个人觉得其实单独来说没有那么王道 我想听听你的看法

ppcl2

) O0 y1 i. ~4 H
$ x( S7 J3 e" I* Y3 {. G5 \7 k7 W
哈哈，你说的这些人一个也没听说过，当然不是说他们不牛，俺不做PGC已经n年了，现在只是偶尔看一下，关注一下进展，但对目前的状况并没有一个整体的把握。
& O* m% J7 Q# ]; o' j我说表观遗传重要，但并不是说他最重要，因为现在并没有证据证明这些表观遗传的变化是原因还是结果，但频繁的变化肯定是有其重要作用，这是已知的事实。" z6 M/ A' D; A+ n" L  j& H
能从ES分化出PGC来，这个更是很多人已经实践过的事情，科研需要一种脚踏实地的奉献精神，还要有开拓精神，现在基本的东西还远没搞清楚，盲目去搞应用，肯定是会失败而终，当然基础是为将来的应用打基础的，PGC的研究远比ES要早，100多年了，结果现在比研究了30来年的ES要落后许多，如和形成，如何迁移，如何扩增，如何风化每一步都有很多事情需要去做，特别是in vivo的东西。Anne McLaren，Brigid Hogan，Azim Surani，Wolf Reik， Ruth Lehmann，Haifan Lin, Chris Wylie，Mitinori Saitou，Yasuhisa Matsui等等还是做了不少东西，特别是Surani A.的东西蛮有意思的, 已过逝的老太太McLaren A.是最值得尊敬的和学习的。

ppcl2

看了一下你说的那几个人，国内做生殖细胞，以后估计是王海滨的天下，其他人跟他比顶多算灌水专家。

ellapan

回复 6# ppcl2
" x' z$ S8 X5 W5 M
# b2 H& O1 F; v7 O
% Z2 O/ ^" ]4 o6 a    真的假的 是夏国良门下的那个王海滨？他还只是新人 虽然成绩不错可是我看也没达到独领风骚的境界呀

ppcl2

恩，就是夏国良门下的那个王海滨，胖小子虽然还是新人，但人家跟老夏比已算青出于蓝胜于蓝了，这老夏自己也承认的，其他几个就目前的业绩就比不过他了，他是实打实在国外名牌大学拿过tenure track AP的，独立后自己也已经发过高水平论文，现在有安民照着，以后大概其能行。动物所有个遭Chris挤兑的千人，要全职回去的话，水平十分了得。

chenkang91

您好，学生我刚开始着手做ES分化到PGC方面的实验。参照的是2011-Reconstitution of the mouse germ cell specification pathway in culture by pluripotent stem cells.其中涉及到ES细胞无feeder培养的问题。我现在的问题是没有确定的Qi-Long Ying的N2B27培养基的配方，现在实验室是否有具体的ES无feeder培养方法？

细胞海洋

回复 chenkang91 的帖子
6 e& \# M. R+ ?- w" Z3 h
( B  B: \, h5 C建议你发新帖提问