关于大鼠骨髓间充质干细胞培养问题

cmw930922

, O1 A9 K  m9 b9 `这是P1的大鼠骨髓间充质干细胞，从实验到现在也做了有五批了，有一下问题想请假大家
& L5 g/ K7 a  E1.图片中体积很大的，成空泡状的是什么细胞' i, O: T% E" C
2.我同时用低糖DMEM、α-MEM、DMEM/F12培养基养，血清是GIBICO的南美（买不起澳胎）感觉中间的增殖最快，最后的形态好，前者不怎么样，不知道大家是怎么样的- }9 @* [0 m3 b8 M
3.由于实验条件有限，我每次取出大鼠的股骨和胫骨都要等4个小时左右才能取出细胞，不知道这样对细胞活力影响是否会很大! g8 f6 x# g# o7 S0 N" N! ]
4.一般大家养大鼠的BMSC能养到第几代，我的细胞老化比较快，p2要7天左右才能传一代

henryjia

建议：
, R  z0 h; }& G& d8 U' C1. 传代一次观察是否有好转
/ @, _/ b% U6 C' ^$ j2.传代时，胰酶处理时间控制在2分钟内，只收取脱壁细胞
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: U2 c' x0 L8 g3 j往往原代和一代细胞时会有不纯，传代也是净化提纯过程。
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祝好运！