关于大鼠骨髓间充质干细胞培养问题

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这是P1的大鼠骨髓间充质干细胞，从实验到现在也做了有五批了，有一下问题想请假大家
" R7 [% t& ?  t1 A+ v+ S4 q8 R. G1.图片中体积很大的，成空泡状的是什么细胞
0 D4 E) H5 k4 }4 m5 g$ `2.我同时用低糖DMEM、α-MEM、DMEM/F12培养基养，血清是GIBICO的南美（买不起澳胎）感觉中间的增殖最快，最后的形态好，前者不怎么样，不知道大家是怎么样的
' e4 p5 ^4 r" D  \5 o) E: j% E3 \3.由于实验条件有限，我每次取出大鼠的股骨和胫骨都要等4个小时左右才能取出细胞，不知道这样对细胞活力影响是否会很大9 m9 y5 ^; O1 y! L8 m5 z/ w$ U
4.一般大家养大鼠的BMSC能养到第几代，我的细胞老化比较快，p2要7天左右才能传一代

henryjia

建议：9 w1 U5 x5 c* u1 S3 N0 y
1. 传代一次观察是否有好转7 _$ v, k, @( m, `
2.传代时，胰酶处理时间控制在2分钟内，只收取脱壁细胞, @6 h, S! K; u( C5 L! g4 d9 k

  j5 y& @: b9 f( P* V* ^4 {3 x往往原代和一代细胞时会有不纯，传代也是净化提纯过程。, }% ^, [9 E! m/ R/ a

0 }2 O- N( L" J祝好运！