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楼主: 5784630
go

急求脐带贴壁法分离培养步骤   [复制链接]

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发表于 2010-5-11 11:23 |只看该作者
回复 8# realinter 0 Y6 m/ a+ q! O! b+ K* E( ~( h, C! d

1 G+ I) Q: B  c1 j4 d
( J/ U: x% K2 I- s2 S/ d1 z    谢谢,前几天又取了一次,考虑贴壁时胶太多,就用胰酶消化加离心,想去除一下,但是现在看胶还是很多,影响贴壁,组织块贴不到瓶壁上,自己就滑开了
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发表于 2010-5-11 11:37 |只看该作者
注意血管的剥离,要剪成2厘米小段进行剥离胶体,这样可以一对一的培养在75底面积培养瓶内,培养液体积在20ml,轻轻的摆动,使组织块均匀分布于瓶底,旋松瓶盖。
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发表于 2010-5-11 11:49 |只看该作者
请问Robert-A,2CM剥离血管后是否剥离外膜呢?切成多大的体积(有人说1mm 有人说0.5 cm)?切时用剪刀和手术刀片有区别吗?多长的脐带铺到75培养瓶呢?是否需要先让它贴壁1小时再加入培养基?
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发表于 2010-5-11 13:37 |只看该作者
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回复 9# hawkyiger $ E& r1 A+ [: t5 K* e: P* E
我们不用剪刀,那样会损失大量目的细胞....用刀片削....用的是锋利度不是剪切力....而且我们一般不用胶原酶...我们用的是细胞刮处理传代....
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发表于 2010-5-12 09:56 |只看该作者
要有耐心哈,一般12天以后才有细胞爬出的,呵呵
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发表于 2010-6-17 09:09 |只看该作者
回复 8# realinter
" O4 X0 g2 m/ K1 g; {# ]# ]2 v" j$ o( A$ P. c$ C
6 v  S* T3 G9 ~  N+ S5 T. l7 S
    2厘米???????不会吧,是不是2毫米啊?

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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-6-18 19:35 |只看该作者
血腥味吧
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