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用流失细胞术进行MSC鉴定,一次需要多少细胞数量?     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-4-28 21:12 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
用流失细胞术进行MSC鉴定,一次需要多少细胞数量?谢谢~\(≧▽≦)/~啦啦啦
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沙发
发表于 2010-4-28 21:28 |只看该作者
10的5次到6次~~~
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藤椅
发表于 2010-4-29 00:01 |只看该作者
10的5次,一般要重复几次
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板凳
发表于 2010-4-29 08:21 |只看该作者
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首先是你要标记几种抗体,每种抗体需要的上机检测细胞数量一般为10的4(可以在流式细胞仪上设置,觉得细胞数量少可以调低一点)。但还是尽量多准备一些,免得到时候没办法继续。
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报纸
发表于 2010-5-5 11:13 |只看该作者
机检测细胞数量一般为10的5次到6次,在抗体染色前需要在显微镜下计数,初步估计一下,然后每支流式管中提供需要500UL体积就可以。
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地板
发表于 2010-5-5 20:30 |只看该作者
检测细胞数量标准1X10的6次左右,我们一般用10的5次就可以,而且可以省抗体,(4次太少)。如果是胞内的,需要透膜则细胞要加倍。每支流式管需要液体300-500微升,如果细胞少,最好体积小些。
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发表于 2010-5-5 21:33 |只看该作者
首先纠正一下楼主,是流式细胞术而不是“流失细胞术”,细胞流失恰恰是很多新手这一实验失败的原因。! F. y5 K4 ~3 e  \
楼上几位回答的都不错,需要提醒的是楼主要预留足够数量的对照,根据你的实验分组和荧光标记种类确定,后者指的是PE的用同型Ig-PE,FITC的用同型Ig-FITC。
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发表于 2010-5-6 10:01 |只看该作者
流式细胞仪可以用来计算细胞数量吗?我是新手,还不太懂,请教了。

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发表于 2010-5-7 22:00 |只看该作者
回复 8# qianqianlaile
1 m  B' A5 w& q) `2 p3 v. m5 V9 w+ j. z; z

9 X6 r8 O3 b- K     呵呵,不是...是鉴定,分选..' q$ y1 ^) G5 S2 {6 e5 A7 e
     流式细胞计是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。
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发表于 2010-5-7 22:08 |只看该作者
一般需要1000000个细胞比较保险,细胞收集离心,肉眼能够看见基本就够用了。
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