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楼主: mbpsky	go 脐血MSC和红细胞裂解液的讨论 [复制链接]

willow0711

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11楼

发表于 2013-8-28 10:49 |只看该作者

回复金戈的帖子! N7 W5 v6 H5 `, l9 `- @
8 Y7 _# }. }$ B' h
哦，裂解红细胞时，细胞密度是多少？工作液和细胞悬液的比例是多少？要作用多长时间呢？谢谢您

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金戈

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金话筒帅哥研究员优秀版主小小研究员热心会员积极份子

12楼

发表于 2013-8-28 19:13 |只看该作者

回复 willow0711 的帖子
. z2 G4 Q& [4 d* u7 t2 @" O$ c( }6 z
细胞用离心后的压积，不用悬液。加的体积比例要看你样品中红细胞的量。比如外周血，红细胞比例比较高，就要多加，如果你消化的组织红细胞量少，就可以少加。9 {4 W$ g0 ^, g- U+ y) E4 n% I

加入约5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2分钟。; N3 `" d- Z3 \4 T
例如细胞沉淀的体积为1ml，则加入6-10ml的红细胞裂解液。裂解3 H; c; z8 P5 V$ d& l
2-5分钟，加入培养基或PBS洗涤离心。如果一次裂红不完全，还可以再重复一次。