脐血MSC和红细胞裂解液的讨论

mbpsky

请问一下战友们" A; B: _2 `/ y8 H) o, i
你们分离MSC时脐带血用红细胞裂解液吗？
' t) ~1 }: b+ R8 h% H- S请用的战友介绍一下配方和用法/ k$ n. x, n0 O3 L1 \, s8 l! R8 ?! h
先谢谢了！

echo

养间充质的时候，不用裂解液也可以的。脐血分离后红细胞是挺多的，但是直接贴壁来养间充质没有什么问题。

mbpsky

回复 2# echo
- b7 `, l4 D4 z
# b3 c7 J: A& q. x3 V7 _6 {: \2 e$ v
    直接贴壁效果不好吧，细胞不纯...尤其是脐血的..都是幼细胞，贴壁能力也很强的

Robert-A

养MSC不用裂解液，如果你想用的话可以用氯化铵或高渗氯化钠都可以的

echo

回复 3# mbpsky
' o; C/ b9 M. y! o% ~
. ]6 |  I% g  L0 U% Y; r2 C. I( f7 O# K
    摸索换液时间应该还可以。

willow0711

回复 Robert-A 的帖子  q: W: E! F2 w
3 U5 N+ Y0 L2 o2 K# B9 Q
你好，请问你说的氯化铵或高渗氯化钠的具体浓度是多少？怎么配置？作用是多长？谢谢

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓还低

金戈

氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）# z: f+ a% F& b2 v; O
80.2 g NH4Cl (1.5 M)" b# c3 b7 d; p2 f
8.4 g NaHCO3 (100 mM)$ `$ b9 Q; {& n- j# z# _
3.7 g EDTA二钠 (10 mM)4 A: Z. [0 F5 n" v) d
加水至900ml，然后用1N的HCl或1N的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。
' ^" C. d; @- b: \该10×的储存液可在4℃保存6个月。! }, i8 @5 p( S8 s
工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓的还低，所以有可能会分离不成功。

jxaf3900824

可以不用红细胞裂解液，贴壁生长挺好。: A! [- ~, B; F0 T2 S