脐血MSC和红细胞裂解液的讨论

mbpsky

请问一下战友们$ }- P. X: F4 v" T' k/ b) t
你们分离MSC时脐带血用红细胞裂解液吗？8 Q' G1 l% H& {* J
请用的战友介绍一下配方和用法7 I  e# u7 n  f! \4 x0 N4 F
先谢谢了！

echo

养间充质的时候，不用裂解液也可以的。脐血分离后红细胞是挺多的，但是直接贴壁来养间充质没有什么问题。

mbpsky

回复 2# echo
8 ?  u) c" ?5 x* R; e  x# p
" A  ~; M- v% w6 H3 E2 ?# x5 ]
0 d3 ~' f% \, p$ m# m9 T% a; V7 n9 T    直接贴壁效果不好吧，细胞不纯...尤其是脐血的..都是幼细胞，贴壁能力也很强的

Robert-A

养MSC不用裂解液，如果你想用的话可以用氯化铵或高渗氯化钠都可以的

echo

回复 3# mbpsky 8 w" C( T( m2 W7 o
8 T4 x% X# k; s( @2 }/ S! Z" Z
% t% T) Y! k/ _& Y% l% ~. m
    摸索换液时间应该还可以。

willow0711

回复 Robert-A 的帖子
1 d* M' }6 P- {, s( O
* C. Q$ B* w6 ]4 u$ ^7 p/ e$ a你好，请问你说的氯化铵或高渗氯化钠的具体浓度是多少？怎么配置？作用是多长？谢谢

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓还低

金戈

氯化铵红细胞裂解液（10×的储存液）2 X6 U1 w. Y$ [# D- a
80.2 g NH4Cl (1.5 M)" W6 @  l0 y: v
8.4 g NaHCO3 (100 mM)
. a" v) B$ p  s/ f; s1 f( r3.7 g EDTA二钠 (10 mM)
1 F+ A7 Q) Q4 f' _9 z加水至900ml，然后用1N的HCl或1N的NaOH调节pH值至7.4。最后加水至1升。
  M  T& }- x& [) F( n6 Z$ @9 O7 u9 x该10×的储存液可在4℃保存6个月。
  k# r  n* l/ A9 y) s* Z工作液的配制：在使用前蒸馏水稀释10倍即可。（1份储存液加上9份水）。工作液用来裂解红细胞。

金戈

脐带血中间充质细胞的含量很低，比骨髓的还低，所以有可能会分离不成功。

jxaf3900824

可以不用红细胞裂解液，贴壁生长挺好。: s% |0 o: m( [% R8 j8 b