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本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-21 16:33 编辑 5 \* a( d& F" P( m0 e1 ?
6 P8 N0 }: j1 v4 r【英文题名】 Experiment about Chondrogenic Potential of Adipose Derived Mesenchymal Stem Cells with PLGA in Vitro and in Vivo / I1 V2 A @/ d" K& M; r6 o
【作者中文名】 李宝军;
& e7 F, h6 E: a6 T! y( Z【导师】 邓展生;
3 X" x( R, n5 J) [【学位授予单位】 中南大学;
- @- l6 f0 a5 T7 Y【学科专业名称】 外科学
3 U V6 M( r% I, c K6 u4 c7 `5 z【学位年度】 2007
; u( ~, D5 S5 G& _ R: ], w【论文级别】 博士 c$ V U4 y- F9 P: f! s( }
【网络出版投稿人】 中南大学
8 p3 j. P" K2 ~【网络出版投稿时间】 2007-11-26 ! ^6 L3 G5 K% x% A7 [2 h: s
【关键词】 脂肪间充质干细胞; 细胞培养; 组织工程; 微团培养; 转化生长因子β_1; 软骨分化; 聚乳酸/聚乙二醇酸聚合支架(PLGA); 异位成软骨; 7 \; }. e) F4 f( t$ Y
【英文关键词】 tissue engineering; adipose-derived mesenchymal stem cells; cell culture; micromass cultures; differentiation; PLGA; scaffolds; heterotopic chondrogenesis; & }: h/ d# W! E" I% V$ ^
【中文摘要】 第一章脂肪间充质干细胞的分离、培养和鉴定 目的探讨脂肪间充质干细胞的分离、培养方法,观察其生长增殖情况,鉴定其生物性特征。 方法以S-D大鼠为研究对象,机械分离,胶原酶消化腹股沟和附睾脂肪组织,获取细胞培养于含新生牛血清体积分数为0.1的低糖DMEM培养基中,利用干细胞的附壁生长特性,通过更换培养基而不断纯化获取脂肪间充质干细胞,镜下观察细胞形态变化。MTT法测定传3、5和10代细胞增殖情况。流式细胞仪检测传5代细胞表面CD29、CD34和CD44表达情况。 结果原代培养后24小时看见微少贴壁细胞,初起为小圆形,48小时后可见梭形、短梭形和多角形贴壁细胞,3天后成纤维样细胞明显增多,5天左右进入对数增长期,8天左右细胞单层融合接近90%。传代细胞于2小时即可完成贴壁,生长较快,多数为成纤维样细胞,6天左右细胞单层融合。传3代后细胞形态均一。10代以后细胞则逐渐有宽大梭形样变。生长曲线显示传3、5代脂肪间充质干细胞均有较强的增殖能力,其中传5代细胞更为明显,而传10代细胞的增殖能力逐渐减弱。流式细胞仪检测传5代细胞有95%表达CD44,96%表达CD29,而只有5%表达CD34... 8 s4 y; D) |+ e: O/ v+ k
【英文摘要】 ChapterⅠThe isolation, culture and identificationadipose-derived mesenchymal stem cells Objective To master the method of isolation and culture ofadipose-derived mesenchymal stem cells, and evaluate their growth andproliferation, still identify their biological characteristics. Methods The rat's inguinal and testicle fat pads were excised, thendigested with 0.075% collagenase, then the cells were cultrued inDulbecco modified Eagle medium (DMEM) with 10% new-born calfserum. The culture medium i... " r( u- w6 D1 j( b. }( N3 F, j
【DOI】 CNKI:CDMD:1.2007.197952
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